[发明专利]一种微生物发酵法生产β-胸苷的生产工艺

摘要

本发明公开了一种微生物发酵法生产β‑胸苷的生产工艺，包括菌种培养、种子培养和发酵培养工艺得到发酵液，通过优化发酵条件，减少发酵级数，并且使工艺易于控制，调整培养基的配方，降低发酵成本。本发明的有益效果为：本发明工艺简单，发酵级数少，工艺稳定易于控制，成本较低，适合工业生产。

主权项

一种微生物发酵法生产β‑胸苷的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤，（1）菌种培养a1. 将细菌接种于盛有培养基的培养皿A中，于36‑37℃培养22‑24h；将生长成熟的菌种继续接种于培养皿B中，于36‑37℃培养12‑16h；b1. 将培养皿B用生理盐水冲洗，得菌液，备用；（2）种子培养a2. 向种子罐中加入适量的水，依次加入酵母浸粉5‑25g/L，氯化钠3‑10 g/L，磷酸二氢钾1‑5 g/L，磷酸氢二钾1‑5 g/L，硫酸铵1‑5 g/L，甘油10‑60 g/L，消泡剂0‑1 g/L，搅拌混匀；b2. 用碱液将PH调至7.2‑7.8，高温高压灭菌；c2. 将罐温降到35‑40℃，用将菌液接入种子罐，罐温35‑40℃，罐压0.03‑0.07Mpa，培养时间为5‑24h，得种子液；（3）发酵培养a3. 培养基配方为：六偏磷酸钠2‑10 g/L、磷酸二氢钾2‑10 g/L、磷酸氢二铵2‑10 g/L、柠檬酸0.1‑1 g/L、甘氨酸1‑5 g/L、酵母浸粉0‑40 g/L、脱脂豆粉10‑50 g/L、玉米浆0‑100 g/L、胰蛋白胨0‑10 g/L、氯化钙0‑5 g/L、消泡剂0.2‑0.8 g/L、三氯化铁0.01‑0.05 g/L、硫酸亚铁0.01‑0.05 g/L、烟酸0.005‑0.02 g/L、维生素B1 0.005‑0.02 g/L，将配好的培养基加入发酵罐中；b3. 用氨水调pH至7.2‑7.8，高温高压灭菌；c3. 将罐温降到30‑37℃，分别加入葡萄糖2‑10 g/L，七水合硫酸镁1‑5 g/L，碳酸钙2‑10 g/L，混匀；d3. 将种子液接种至发酵罐中，罐温30‑37℃，罐压0.03‑0.07Mpa，培养时间为1‑5天，得发酵液。