[发明专利]一种白菜成熟花粉细胞荧光原位杂交的方法

摘要

本发明属于作物分子细胞遗传学技术领域，具体涉及一种白菜成熟花粉细胞荧光原位杂交的方法。该方法步骤包括白菜成熟花粉时期花蕾的确定、成熟花粉细胞制片、探针标记、原位杂交和信号检测等。本发明的特点是：取白菜开花前1‑2 d的花蕾，在50%冰醋酸溶液中分离出新鲜花粉粒，采用垂直压片法破碎花粉壁，释放出完整的营养细胞与生殖细胞；细胞标本经预处理后与变性探针在80℃共变性3 min，直接进行原位杂交，获得了信号清晰的荧光杂交图片，揭示出目标DNA在营养细胞和生殖细胞中的信号表现差异。本发明填补了十字花科芸薹属植物成熟花粉细胞荧光原位杂交技术空白，应用于白菜花粉发育的分子细胞遗传学研究中。

主权项

一种白菜成熟花粉细胞荧光原位杂交的方法，其特征在于：以制备的白菜成熟花粉细胞为靶相，通过荧光原位杂交（FISH），在营养细胞和生殖细胞能观察到不同的FISH信号模式。