[发明专利]鹿血清的分离制备方法

摘要

本发明公开了一种鹿血清的分离制备方法，该方法将从清洁消毒后的待采血鹿无菌采血所得的鹿全血经静置、离心分离、去除纤维蛋白、灭活、降低IgG浓度和葡萄糖含量后，将所得血清采用一定剂量的γ射线照射照射去除病毒和支原体后，并边用紫外线照射除菌边用无石棉蔡氏滤片过滤得到鹿血清滤液，最后采用过滤膜过滤得到成品鹿血清；该制备方法简便快捷，工艺稳定且适于大批量生产，且所得鹿血清不含纤维蛋白，IgG浓度和葡萄糖含量低，能够彻底杜绝病毒、病菌和支原体的污染，制备所得的鹿血清能够用于含血清细胞培养液的制备。

主权项

一种鹿血清的分离制备方法，其特征在于：包括下述步骤：(1)采血：将待采血鹿采用消毒液进行鹿体全身清洁消毒处理后，无菌采血法采取鹿全血至离心瓶内，将离心瓶置于4～5℃下恒温静置5～6h；(2)分离：将经(1)处理后的鹿全血在4～5℃的条件下，采用2000～3000rpm的转速离心40～50min，离心结束后在真空环境下从离心瓶中抽取血清，将该抽取所得的血清置于‑25～‑30℃下保存备用，得到冷冻的血清；(3)去除纤维蛋白：将经(2)处理所得的冷冻血清置于4～5℃环境中融化，将融化后所得血清通过多层无菌纱布过滤，收集滤液；(4)灭活：将经(3)处理所得滤液置于56～60℃下恒温水浴30～40min，水浴过程中随时晃动滤液；(5)降低IgG浓度和葡萄糖含量：将经(4)处理后的滤液采用层析法将IgG浓度降低至小于5μg/ml；然后采用能够透析蛋白分子量为12000～14000的透析膜于0.15～0.18mol/L的NaCl水溶液中透析至葡萄糖含量小于0.5mg/ml；(6)去除病毒和支原体及除菌过滤：将经(5)处理后的血清采用剂量为30～45KGy的γ射线照射；然后将上述血清装入连续流血浆灭菌器内，并用紫外线以45～50°照射该装有血清的连续流血浆灭菌器，照射同时将血清通过EK级无石棉蔡氏滤片得到滤液，然后再将该滤液通过0.22～0.25μm过滤膜过滤，最后经100～150nm过滤膜过滤，得到鹿血清。