[发明专利]鹿血清的分离制备方法在审
申请号: | 201610103829.3 | 申请日: | 2016-02-25 |
公开(公告)号: | CN105647848A | 公开(公告)日: | 2016-06-08 |
发明(设计)人: | 党平;宋平;陈建兵;杜雨威;王瑜 | 申请(专利权)人: | 苏州红冠庄药物研究有限公司 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00 |
代理公司: | 昆山四方专利事务所 32212 | 代理人: | 盛建德 |
地址: | 215300 江苏省苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 鹿血 分离 制备 方法 | ||
1.一种鹿血清的分离制备方法,其特征在于:包括下述 步骤:
(1)采血:将待采血鹿采用消毒液进行鹿体全身清洁消 毒处理后,无菌采血法采取鹿全血至离心瓶内,将离心瓶置于 4~5℃下恒温静置5~6h;
(2)分离:将经(1)处理后的鹿全血在4~5℃的条件下, 采用2000~3000rpm的转速离心40~50min,离心结束后在真空 环境下从离心瓶中抽取血清,将该抽取所得的血清置于 -25~-30℃下保存备用,得到冷冻的血清;
(3)去除纤维蛋白:将经(2)处理所得的冷冻血清置于 4~5℃环境中融化,将融化后所得血清通过多层无菌纱布过滤, 收集滤液;
(4)灭活:将经(3)处理所得滤液置于56~60℃下恒温 水浴30~40min,水浴过程中随时晃动滤液;
(5)降低IgG浓度和葡萄糖含量:将经(4)处理后的滤 液采用层析法将IgG浓度降低至小于5μg/ml;然后采用能够 透析蛋白分子量为12000~14000的透析膜于0.15~0.18mol/L 的NaCl水溶液中透析至葡萄糖含量小于0.5mg/ml;
(6)去除病毒和支原体及除菌过滤:将经(5)处理后的 血清采用剂量为30~45KGy的γ射线照射;然后将上述血清装 入连续流血浆灭菌器内,并用紫外线以45~50°照射该装有血 清的连续流血浆灭菌器,照射同时将血清通过EK级无石棉蔡 氏滤片得到滤液,然后再将该滤液通过0.22~0.25μm过滤膜过 滤,最后经100~150nm过滤膜过滤,得到鹿血清。
2.根据权利要求1所述的鹿血清的分离制备方法,其特 征在于:步骤(1)中待采血鹿为身体状况健康、精神状态良 好、无疫情史的成年鹿、小鹿和胎鹿中的一种。
3.根据权利要求1所述的鹿血清的分离制备方法,其特 征在于:步骤(1)中采用2wt.%碘酒和75vol.%酒精作为消毒 液依次对待采血鹿进行鹿体全身清洁消毒。
4.根据权利要求1所述的鹿血清的分离制备方法,其特 征在于:步骤(3)中采用八层无菌纱布对融化所得血清进行 过滤。
5.根据权利要求1所述的鹿血清的分离制备方法,其特 征在于:步骤(4)中将滤液置于56℃下恒温水浴30min。
6.根据权利要求1所述的鹿血清的分离制备方法,其特 征在于:步骤(6)中所述连续流血浆灭菌器的流速为 250~270mL/min。
7.一种根据权利要求1至6中任一权利要求所述分离制 备方法制备所得的鹿血清。
8.根据权利要求7所述的鹿血清的应用,其特征在于: 所述鹿血清在含血清细胞培养基中的应用。
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