[发明专利]扩增DNA的方法在审
申请号: | 201610052456.1 | 申请日: | 2016-01-26 |
公开(公告)号: | CN105602939A | 公开(公告)日: | 2016-05-25 |
发明(设计)人: | 陆思嘉;殷广军 | 申请(专利权)人: | 序康医疗科技(苏州)有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京市君合律师事务所 11517 | 代理人: | 赵昊;吴瑜 |
地址: | 215028 江苏省苏州市苏州工业*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本申请涉及一种扩增细胞基因组DNA的方法,包括:(a)提供包括基因组DNA、第一类引物、第二类引物、核苷酸单体混合物和核酸聚合酶的反应混合物,其中所述第一类引物从5’端到3’端包含通用序列和可变序列,所述第二类引物包含所述通用序列且不包含所述可变序列;(b)将所述反应混合物置于第一温度循环程序以得到基因组扩增产物;(c)将步骤(b)得到的反应混合物置于第二温度循环程序,使得所述第二类引物的通用序列能够与所述基因组扩增产物的3’端配对并扩增所述基因组扩增产物以得到扩大的基因组扩增产物,其中在所述步骤(b)和所述步骤(c)之前提供所述反应混合物。本申请还涉及一种用于扩增基因组DNA的试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 扩增 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种扩增细胞基因组DNA的方法,所述方法包括:(a)提供反应混合物,其中所述反应混合物包括所述基因组DNA、第一类引物、第二类引物、核苷酸单体混合物、和核酸聚合酶,其中所述第一类引物从5’端到3’端包含通用序列和可变序列,其中所述通用序列由G、A、C和T四种碱基中的三种或者两种组成,条件是所述通用序列不同时包括G和C,并且所述第二类引物包含所述通用序列且不包含所述可变序列;(b)将所述反应混合物置于第一温度循环程序,使得所述第一类引物的可变序列能够与所述基因组DNA配对并扩增所述基因组DNA以得到基因组扩增产物,其中所述基因组扩增产物的5’端包含所述通用序列,3’端包含所述通用序列的互补序列;(c)将步骤(b)得到的反应混合物置于第二温度循环程序,使得所述第二类引物的所述通用序列能够与所述基因组扩增产物的3’端配对并扩增所述基因组扩增产物以得到扩大的基因组扩增产物,其中,在所述步骤(b)和所述步骤(c)之前提供所述反应混合物。
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