[发明专利]一种胚胎干细胞向肝脏组织结构诱导分化的方法有效
| 申请号： | 201610013206.7 | 申请日： | 2016-01-06 |
| 公开（公告）号： | CN105543175B | 公开（公告）日： | 2020-07-03 |
| 发明（设计）人： | 胡安斌 | 申请（专利权）人： | 中山大学附属第一医院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N5/071 |
| 代理公司： | 广州市华学知识产权代理有限公司 44245 | 代理人： | 裘晖 |
| 地址： | 510080 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明属于细胞培养技术领域，具体涉及一种胚胎干细胞向肝脏组织结构诱导分化的方法。本发明将E‑cadherin基因作为外源基因转染胚胎干细胞，得到高效表达E‑cadherin基因的胚胎干细胞，然后培养分化，得到拟胚体，将其移植至含有EMT抑制剂的三维细胞培养系统中进行诱导培养，得到三维生长的肝脏组织结构。本发明首次从细胞黏附和EMT水平的角度研究ESC体外向肝脏组织结构分化，E‑cadherin转染后表达水平稳定控制，可保持细胞分化中足够的细胞黏附力，使其不易分散为单层细胞；降低胚胎干细胞体外分化过快的EMT水平，调控分化肝实质细胞以及肝间质细胞同步分化以形成肝脏组织，更加符合体内组织发育机理。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 胚胎 干细胞 肝脏 组织 结构 诱导 分化 方法 | ||
【主权项】：
一种胚胎干细胞向肝脏组织结构诱导分化的方法，其特征在于包含如下步骤：(1)将E‑cadherin基因作为外源基因转染胚胎干细胞，得到高效表达E‑cadherin基因的胚胎干细胞；(2)将步骤(1)得到的高效表达E‑cadherin基因的胚胎干细胞进行培养分化，得到包含三胚层结构的拟胚体；(3)将步骤(2)得到的包含三胚层结构的拟胚体移植至含有EMT抑制剂的细胞培养系统中进行诱导培养，得到三维生长的肝脏组织结构；步骤(3)中所述的EMT抑制剂为EMT抑制剂sFRP‑1。
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