[发明专利]一种右归丸中多种成分含量的检测方法

摘要

本发明公开了一种右归丸中多种成分含量的检测方法。所述检测方法包括如下步骤1)利用甲醇超声提取右归丸，然后进行滤膜过滤，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液；2)向所述供试品溶液中加入内标溶液，作为待测样品；3)采用高效液相色谱‑电喷雾串联质谱检测所述待测样品，即得到右归丸中下述任一种成分的含量。本发明建立的LC‑ESI‑MS/MS(high‑performance liquid chromatography coupled with mass spectrometry)检测方法具有灵敏度高和专属性强的特点，并对20批不同来源的市售右归丸成药中的16种成分进行了定量测定，覆盖范围广，以期建立系统、全面的右归丸质量评定方法。

主权项

一种右归丸中多种成分含量的检测方法，包括如下步骤：1)利用甲醇超声提取右归丸，然后进行滤膜过滤，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液；所述甲醇的用量为：0.1g所述右归丸需要添加1～5mL甲醇；所述超声提取的频率为20～80KHz，所述超声提取的时间为30～60min；所述滤膜为尼龙66膜，所述滤膜的孔径为0.22μm或0.45μm；2)向所述供试品溶液中加入内标溶液，作为待测样品；所述内标溶液为丁螺环酮的甲醇水溶液；所述丁螺环酮的用量为：1～5ng/mL所述待测样品；3)采用高效液相色谱‑电喷雾串联质谱检测所述待测样品，即同时得到右归丸中下述16种成分的含量：a)新乌头原碱、b)山茱萸新苷、c)地黄苷A、d)附子灵、e)宋果灵、f)金丝桃苷、g)苯甲酰次乌头原碱、h)松果菊苷、i)苯甲酰乌头原碱、j)地黄苷D、k)苯甲酰中乌头原碱、l)尼奥灵、m)马钱苷、n)多根乌头碱、o)獐芽菜苷和p)莫诺苷；所述高效液相色谱‑电喷雾串联质谱检测步骤中的色谱条件如下：流动相A：体积分数为0.05％～0.2％的甲酸的乙腈溶液；流动相B：体积分数为0.05％～0.2％的甲酸的水溶液；色谱柱：Agilent Eclipse Plus‑C18色谱柱，柱长为100mm、柱径为2.1mm和填料粒径为3.5μm；柱温：20～30℃；流速：0.45mL/min；进样体积：10或20μL；每个样品的运行时间：12.0min；洗脱梯度如下：0‑1.5min：流动相A体积分数为98％，流动相B体积分数为2％；1.5‑4min：流动相A体积分数从98％降至55％，流动相B体积分数从2％升至45％；4‑8min：流动相A体积分数从55％降至15％，流动相B体积分数从45％升至85％；8‑9min：流动相A体积分数为15％，流动相B体积分数为85％；9‑9.01min：流动相A体积分数从15％升至98％，流动相B体积分数从85％降至2％；9‑12min：流动相A体积分数为98％，流动相B体积分数为2％；所述高效液相色谱‑电喷雾串联质谱检测步骤中的质谱条件如下：离子源：电喷雾离子化源；质谱工作模式：正离子扫描的MRM检测模式；气帘气、雾化气和涡流加热气均使用氮气，其设定值分别为20～30psi、50～60psi和50～60psi；离子源温度为350～500℃；离子源喷射电压为4500～5500V。