[发明专利]高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法

摘要

本发明公开了高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物及其纯化方法。将灵芝提取液通过大孔树脂和MCI GEL树脂纯化，脱色，浓缩脱色液后喷雾干燥后，获得具有明显的抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜。本发明优点在于制备方法简单快速；无毒性溶剂，对人体及环境无损害；纯化物生产成本低，质量稳定，适宜工业生产，而且纯化的灵芝总三萜有明显的抗人源肿瘤细胞活性，可进一步开发成抗癌药物。

主权项

1.高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜的纯化方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1）先将灵芝子实体粉碎，再加入质量为灵芝子实体的4～6倍量体积分数为60%～80%的乙醇回流提取1～3h, 回流提取2～4次，即得灵芝子实体醇提液，再对灵芝子实体醇提液进行浓缩，使其乙醇的体积分数为0%～20%；2）将步骤 1）所得物通过大孔树脂，上样流速为 0.5BV/h～5BV/h，再进行洗脱，洗脱时先用4～8倍柱体积水洗脱，洗脱流速为 2BV/h ～ 6BV/h，弃去水洗部分，再用4～ 8倍柱体积乙醇洗脱，乙醇体积分数为 60%～90%，洗脱流速为 1BV/h～4BV/h，收集醇洗脱液；3）将步骤 2）中所得醇洗脱液减压旋干，得到初步纯化物，再加入重量为初步纯化物2‑5 倍的乙醇，搅拌溶解；4）将步骤 3）所得物通过MCI GEL树脂，上样完后，先加入去离子水洗脱到流出液无醇味，再用6～8倍柱体积乙醇溶液洗脱，乙醇体积分数为10%～30%，弃去该部分洗脱液，再用体积分数为80%～90%的乙醇洗脱，乙醇用量为4～8倍，收集洗脱液；5）将步骤 4）所得醇洗脱液过聚酰胺柱进行脱色，取脱色液；6）浓缩脱色液，然后进行喷雾干燥，获得具有高抗人源肿瘤细胞活性的灵芝总三萜纯化物；所述大孔树脂是D‑101苯乙烯型大孔树脂或HPD‑100苯乙烯型大孔树脂。