[发明专利]一种维生素A棕榈酸酯的合成方法

摘要

本发明涉及一种维生素A棕榈酸酯的合成方法，化学酶法合成维生素A棕榈酸酯，主要包括两步反应：(1)有机溶剂作助溶剂，用碱液水解维生素A醋酸酯，生成维生素A醇；(2)用有机溶剂萃取维生素A醇，水洗萃取液除去能与棕榈酸反应的助溶剂，固定化脂肪酶在非水相体系中催化维生素A醇与棕榈酸反应合成维生素A棕榈酸酯。本发明所提供的合成方法在生物催化过程中以维生素A醇代替维生素A醋酸酯做底物，酯化合成维生素A棕榈酸酯，提高了底物浓度，具有更高的转化率，缩短了反应时间，降低了底物摩尔比，固定化脂肪酶使用寿命延长，成本降低，可达到工业化生产的要求，填补目前市场上酶法生产维生素A棕榈酸酯的缺口。

主权项

一种维生素A棕榈酸酯的合成方法，其特征在于所述合成方法为：(1)以维生素A醋酸酯为底物，以碱液为溶剂，以有机溶剂为助溶剂，在150～200rpm，15～20℃条件下进行水解反应，反应完全后，获得水解反应液；所述碱液的体积用量以碱物质的量计，所述底物与碱物质的量之比为1：1～4；所述有机溶剂的体积用量以底物质量计为0.5～10ml/g；所述有机溶剂为甲醇、无水乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、乙腈或丙酮；(2)向步骤(1)获得的水解反应液中加入萃取剂，取上层有机相用蒸馏水洗涤后再加入无水硫酸钠干燥，获得预处理后的萃取液；所述萃取剂为异辛烷、正庚烷、石油醚、正己烷或环己烷；(3)向步骤(2)获得的预处理后的萃取液中加入棕榈酸，无水硫酸镁和固定化脂肪酶构成酯化反应体系，在20～70℃，180rpm条件下进行酯化反应，反应完全后，将反应液后处理，获得维生素A棕榈酸酯；所述固定化脂肪酶是将含南极假丝酵母脂肪酶B基因的重组基因工程菌诱导培养液离心，取上清液提取脂肪酶，然后将脂肪酶用pH值为6的缓冲液配制成酶液，以大孔吸附树脂为载体进行吸附固定化，抽滤，滤饼即获得固定化脂肪酶，所述南极假丝酵母脂肪酶B基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示；所述棕榈酸与步骤(1)加入的维生素A醋酸酯物质的量之比为1～2.5：1，所述无水硫酸镁添加量以萃取液体积计为0.02～0.1g/mL；所述固定化脂肪酶与步骤(1)加入的维生素A醋酸酯质量比为0.05～0.35：1。