[发明专利]一种苦荞麦凝集素的制备方法和应用在审
| 申请号： | 201410326985.7 | 申请日： | 2014-07-10 |
| 公开（公告）号： | CN104086638A | 公开（公告）日： | 2014-10-08 |
| 发明（设计）人： | 崔晓东;王转花;贾乔瑾;申剑 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C07K14/42 | 分类号： | C07K14/42;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18;A61K38/16;A61P35/00 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人： | 张福增 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种苦荞麦凝集素(Tartaty Buckwheat Lectin，TBL)的制备方法，以及该蛋白在制备抗肿瘤药物中的应用。其制备方法是将苦荞麦种子粉碎，加入蛋白提取液低温提取，随后加入硫酸铵沉淀蛋白，再经过脱盐,离子交换层析等步骤获得纯的苦荞麦凝集素蛋白。本发明提供的苦荞麦凝集素，可以特异性地杀伤结直肠癌细胞，并且抑制肿瘤的增殖和转移，可以应用在抗肿瘤药物中。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 荞麦 凝集素 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种苦荞麦凝集素，其特征在于，通过如下方法制得：将烘干的苦荞麦种子，脱壳粉碎后，然后按每克荞麦粉加入10‑15mL pH4.0‑pH5.0的醋酸盐缓冲液，4℃抽提4‑24小时，8000rpm离心20分钟除去沉淀，收集上清；将上清用纱布过滤，除去麸皮，在上清中加入硫酸铵，至80％的饱和度，在4℃搅拌4小时；8000rpm离心30分钟，收集沉淀；用少量pH7.0的PBS缓冲液重新溶解沉淀，上样于脱盐柱，除去硫酸铵，收集蛋白峰得到荞麦蛋白粗提物；将粗提物上样于HiTrapTM DEAE FF弱阴离子交换柱进行分离纯化，收集洗脱峰，将收集的洗脱峰蛋白样品再次上样于脱盐柱，收集蛋白峰，真空冷冻干燥，得到该分子量为62kD的苦荞麦凝集素。
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