[发明专利]亚临界二氧化碳烧结共载细胞多孔微球支架的方法

摘要

本发明公开了一种亚临界二氧化碳烧结共载细胞多孔微球支架的方法，以碳酸氢铵水溶液作为水相，PLGA的有机溶液作为油相，将上述水相分散到油相中，通过均质匀化形成油包水的单乳液；将上述单乳液分散到PVA水溶液中得到水包油包水的复乳；继续搅拌使二氯甲烷挥发，得到固化的多孔微球；收集固化的多孔微球，洗涤，冻干；将冻干的多孔微球与一定数量的细胞共同填入模具中，在亚临界二氧化碳的条件下，烧结成多孔微球支架。本发明在温和的条件下，通过一步法获得共载细胞多孔微球烧结支架，确保微球表面多孔形貌的同时，保证细胞活性。

主权项

一种亚临界二氧化碳烧结共载细胞多孔微球支架的方法，其特征在于：包括：a)将PLGA添加到有机溶剂二氯甲烷中，通过搅拌获得均匀的油相；b)将碳酸氢铵添加到蒸馏水中，通过搅拌获得均匀的水相，其中碳酸氢铵浓度为5％～20％(w/v)；c)将步骤b得到的水相分散到步骤a得到的油相中，通过均质匀化作用，形成油包水的单乳液，其中水相与油相的体积比为1/1～1/20；d)在100～1000rpm搅拌速率下，将步骤c获得的单乳液分散到PVA水溶液中得到水包油包水的复乳液；e)以步骤d中搅拌速率继续搅拌乳液2～12h，使油相中的二氯甲烷挥发，得到固化的多孔微球；f)收集固化的多孔微球，用去离子水洗涤，随后冻干；g)将冻干的多孔微球与2×10⁴～2×10⁷个细胞或50～1000μL含有2×10⁴～2×10⁷个细胞的细胞悬液共同填入模具中，在压力为0.5～7.38MPa，温度为20～40℃的亚临界二氧化碳条件下处理10～1800s，烧结成共载细胞多孔微球支架。