[发明专利]小麦直链淀粉和支链淀粉的纯化方法

摘要

本发明提供一种小麦直链淀粉和支链淀粉的纯化方法，其是采用改进的马丁法提取小麦籽粒面粉中的淀粉，在此基础上用不同的方法处理淀粉，最后提取出高纯度的直链淀粉和支链淀粉。利用本发明方法能够快速从小麦籽粒中提取出高纯度的直链淀粉和支链淀粉，并且检测提取物的纯度。本方法制备出的小麦直链淀粉和支链淀粉标准品可以用于比色法测定小麦淀粉的含量及组成，与目前常用的马铃薯来源标准品相比，大大提高小麦淀粉组成分析的准确性，在小麦淀粉品质研究领域具有很好的应用前景。

主权项

小麦直链淀粉和支链淀粉的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：1)小麦籽粒淀粉的提取将一定量的小麦籽粒用带过滤筛网的磨粉机打磨成粉并去除麸皮，称取50‑200g面粉，加入面粉重量50‑60％的水在功率为600W的和面机中搅拌30min‑45min，搅拌结束后，将面团转入干净的容器中，于室温静置30min‑45min，用4‑6层纱布将静置后的面团包裹，将纱布与面团置于烧杯中，分三次加入面团重量2‑3倍的水揉洗面团，洗出的乳状液即为淀粉粗提液；将粗提液转入离心管中，3500‑4000g离心5‑10min，弃上清，并移除沉淀上方的黄色胶状层，收集管底的白色沉淀即为小麦籽粒淀粉颗粒；2)小麦直链淀粉的提取称取步骤1)中提取的淀粉颗粒10‑20g配制成2‑4w/v％的淀粉液，在磁力搅拌器上持续搅拌淀粉液并加热至65℃±1℃，然后转入65℃±1℃水浴锅中静置分层1‑2h；然后收集上层液体，转入离心管中3000‑4000g离心15‑20min，收集上清液即为小麦直链淀粉粗提取液；用滤纸过滤直链淀粉粗提取液，向滤液中添加滤液1/3体积的丁醇，搅拌1‑2h，室温静置过夜后3000‑4000g离心15‑20min收集沉淀；将丁醇和水按1:3的体积比加入沉淀中并搅拌1‑2h，室温静置4‑6h后3000‑4000g离心15‑20min收集沉淀，用无水乙醇漂洗沉淀3‑4次，冷冻真空干燥沉淀，研磨成粉，于4℃保存；3)小麦支链淀粉的提取称取步骤1)中提取的淀粉颗粒10‑20g配制成2‑4w/v％的淀粉液，在磁力搅拌器上搅拌并煮沸淀粉液30‑45min，当淀粉液温度降至50‑55℃时，加入磷酸缓冲液将淀粉液pH值调至6.3；然后将淀粉液放入灭菌锅中121℃蒸煮2‑3h，再转入沸水浴中搅拌1‑2h，加入淀粉液1/3体积的丁醇，在磁力搅拌器上50‑55℃搅拌30‑45min，转入泡沫盒中静置过夜使直链淀粉和其他杂质自然沉淀，然后转入离心管中8000‑8700g离心20‑30min；离心后溶液分为三层，收集中间层即为支链淀粉粗提取液；向支链淀粉粗提液中加入粗提液1/5体积的丁醇，沉淀残留的直链淀粉，搅拌30‑60min后8000‑8700g离心20‑30min，收集上清液；重复丁醇沉淀直链淀粉的步骤，直至离心后无沉淀产生，然后向粗提液中加入等体积的丁醇，搅拌30‑60min后8000‑8700g离心20‑30min，向粗提液中加入2倍体积的甲醇，摇匀，8000‑8700g离心10‑15min收集沉淀；然后用无水乙醇漂洗沉淀3‑4次，冷冻真空干燥沉淀，研磨成粉，于4℃保存。