[发明专利]S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的制备方法无效
申请号: | 201410040905.1 | 申请日: | 2014-01-28 |
公开(公告)号: | CN103881990A | 公开(公告)日: | 2014-06-25 |
发明(设计)人: | 彭毅;庞朋沙;翟文 | 申请(专利权)人: | 北京爱必信生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N9/14 | 分类号: | C12N9/14;C12R1/78;C12R1/84 |
代理公司: | 北京北新智诚知识产权代理有限公司 11100 | 代理人: | 刘茵;熊国裕 |
地址: | 101111 北京市大兴区北京经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明涉及一种在毕赤酵母中制备S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的方法,包括以下步骤:提供编码S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的核苷酸序列;将所述S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的核苷酸序列克隆到酵母表达载体中;将所述酵母表达载体转化至同一酵母宿主;诱导所述酵母宿主表达N端带有组氨酸标签的S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH);纯化所述N端带有组氨酸标签的S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)。该方法表达工艺简单,表达产物无需经过变性和复性,即可得到有活性的S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH),并且后续的纯化步骤也简单方便。制备的S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)可用于检测心血管疾病的同型半胱氨酸检测试剂盒。 | ||
搜索关键词: | 腺苷 半胱氨酸 水解 sahh 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的制备方法,其特征在于,其包括以下步骤:(1)提供编码S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的核苷酸序列;(2)将所述S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)的核苷酸序列克隆到酵母表达载体中;(3)将所述酵母表达载体转化至同一酵母宿主;(4)诱导所述酵母宿主表达N端带有组氨酸标签的S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH);(5)纯化所述N端带有组氨酸标签的S腺苷同型半胱氨酸水解酶(SAHH)。
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