[发明专利]一种提高重组人干扰素α2b天然构象含率的制备工艺有效
| 申请号： | 201410027089.0 | 申请日： | 2014-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN103804486B | 公开（公告）日： | 2017-05-17 |
| 发明（设计）人： | 宋礼华;王荣海;许培;董世建;周乐春;李增礼;沈毅 | 申请（专利权）人： | 安徽安科生物工程（集团）股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/56 | 分类号： | C07K14/56;C07K1/22;C07K1/14 |
| 代理公司： | 合肥诚兴知识产权代理有限公司34109 | 代理人： | 汤茂盛 |
| 地址： | 230088 安徽省合肥*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种提高重组人干扰素α2b天然构象含率的方法，操作如下将重组人干扰素α2b表达菌体裂解后的菌体裂解液依次用pH不低于7.0的第一透析液和pH低于4的第二透析液进行透析，透析后分离纯化得到天然构象含率高的重组人干扰素α2b。通过采用两步透析法对干扰素α2b进行复性，其中，第二步采用低pH透析的方案，其最初目的在于将进一步降低盐酸胍浓度并更换缓冲体系，同时与去除酸不稳定的杂蛋白。但是通过实验意外发现，这种两步复性法在未降低复性率的同时，可以极大地提高天然构象干扰素的得率，促使SMM及聚集体或中间态向天然构象转化，降低SMM及聚集体含量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 重组 干扰素 天然 构象 制备 工艺 | ||
【主权项】：
一种提高重组人干扰素α2b天然构象含率的方法，操作如下：将重组人干扰素α2b表达菌体裂解后的菌体裂解液依次用pH为7.0～8.0的第一透析液和pH为2.0～3.6的第二透析液进行透析，透析后分离纯化得到天然构象含率高的重组人干扰素α2b；第一透析液透析的温度为4～10℃、时间为12～24h；第二透析液透析的温度为20～37℃、时间为12～24h。
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