[发明专利]脂肪干细胞库构建方法有效
申请号: | 201310675417.3 | 申请日: | 2013-12-13 |
公开(公告)号: | CN103651331A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | 张炳强;于丽;张福琴;孙月光;孙弘 | 申请(专利权)人: | 青岛中天干细胞工程有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02;C12N5/0775 |
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地址: | 266000 山东省青岛市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种脂肪干细胞库的构建方法。脂肪干细胞库构建方法,包括以下步骤:(1)采集脂肪:对供者进行HLA分型检测、ABO/Rh血型、人源特定病毒、梅毒螺旋体感染的检测,然后在无菌场所采集脂肪;(2)冲洗脂肪组织,去除残留的血液,将脂肪组织绞碎为0.5~1mm3的脂肪组织微块;(3)收集脂肪组织微块,在700g离心10min;(4)吸弃下层液体,将脂肪组织微块用二甲基亚砜和血清替代品按照1:9的比例混合的冻存液重悬;(5)分装到冻存管中,放入冻存盒,-80℃冰箱过夜,次日转移到液氮保存;(6)按照供者HLA分型、ABO/Rh血型和性别进行保存,建立可供检索的细胞信息档案。本发明的脂肪干细胞库构建方法,简化操作步骤,减少人工干预错误,提高效率。 | ||
搜索关键词: | 脂肪 干细胞 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种脂肪干细胞库构建方法,包括以下步骤:(1)、采集脂肪:对供者进行HLA分型检测、ABO/Rh血型检测、人源特定病毒包括HIV、HBV、HCV、HTLV、EBV、CMV的检测、梅毒螺旋体感染检测,然后对符合要求的供者在无菌场所采集脂肪;(2)、用含青霉素和链霉素的PBS反复冲洗脂肪组织,去除残留的血液,将脂肪组织绞碎为0.5~1mm3的脂肪组织微块;(3)、收集脂肪组织微块,在700g离心10min;(4)、吸弃下层少量液体,将脂肪组织微块用二甲基亚砜和血清替代品按照1:9的比例混合的冻存液重悬;(5)、将重悬的脂肪组织微块分装到冻存管中,放入冻存盒,‑80℃冰箱过夜,次日转移到液氮保存;(6)、按照供者HLA分型、ABO/Rh血型和性别进行保存,建立可供检索的细胞信息档案,即完成脂肪干细胞库的构建。
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