[发明专利]木聚糖酶的制备方法

摘要

本发明涉及微生物发酵和酶工程技术领域，尤其涉及一种毕赤酵母工程菌发酵生产的饲用木聚糖酶的制作方法。木聚糖酶的制备的方法，包括下述的步骤：活化菌种；扩大培养；二次扩大培养；发酵；过滤；超滤浓缩；加入防腐剂混合均匀，精滤，除菌，灌装。采用本发明的方法所制备得到的木聚糖酶，和普通的木聚糖酶制作方法相比，无论是从耐酸性还是从耐热性方面来看，都明显地具有优势。

主权项

木聚糖酶的制备的方法，包括下述的步骤：活化菌种：用YPD培养基，对含有耐热植酸酶基因的毕赤酵母工程菌进行活化，活化条件为28‑32℃，20‑26h，所述的YPD培养基为酵母浸出粉胨葡萄糖培养基；扩大培养：将活化好的菌种接入摇瓶中，于28‑32℃下，以180‑220r/min的转速进行扩大培养；二次扩大培养：22‑26h后接入种子罐，28‑32℃条件下进一步扩大培养；发酵：经种子罐扩大培养后，接入发酵罐，28‑32℃下， pH4.6‑4.8条件下进行发酵，140‑160h后发酵结束；过滤：将发酵结束的料液，加入1%的硅藻土，混合均匀后，打入板框压滤机进行过滤，过滤压力<0.5MPa；超滤浓缩：过滤澄清后，用膜分子量10000Da的有机膜进行超滤浓缩，浓缩至所需要的酶活；加入防腐剂，所述的防腐剂包括盐和山梨酸钾；盐的浓度为8‑12%，山梨酸钾的浓度为1‑3‰；加入上述的防腐剂后，与滤液混合均匀，在小于0.5Mpa的压力下，精滤、除菌，灌装。