[发明专利]一种RNA扩增与杂交捕获法相结合的检测核酸方法无效
| 申请号： | 201310527722.8 | 申请日： | 2013-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN103525942A | 公开（公告）日： | 2014-01-22 |
| 发明（设计）人： | 李先强;姜昕 | 申请（专利权）人： | 武汉中帜生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 汪俊锋 |
| 地址： | 430075 湖北省武汉市东湖技*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种RNA扩增与杂交捕获法相结合的检测核酸方法。包括如下步骤，从样本中抽提核酸或者裂解样本释放待测核酸；将待测核酸转录扩增，得到RNA产物；将所得RNA产物与标记有生物素的DNA探针一起加入到固相上进行杂交，杂交形成DNA/RNA杂合体，所述固相上包被有识别杂合体的特异抗体或亲和素或链霉亲和素，杂合体被固相捕获；向固相加入标记具有二次扩增能力的酶的亲和素或链霉亲和素或特异识别DNA/RNA杂合体的抗体，实现核酸信号的获得。本发明避免PCR固有的污染问题，可以直接检测RNA分子，勿须进行反转录以及RNA的预分离，极大的简化了操作步骤。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 rna 扩增 杂交 捕获 法相 结合 检测 核酸 方法 | ||
【主权项】：
一种核酸检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1）从样本中抽提核酸或者裂解样本释放待测核酸；2）核酸分子的转录扩增将待测核酸转化成带有一定启动子的双链DNA，根据启动子序列选择相对应的RNA聚合酶，实现核酸分子的转录扩增，得到RNA产物；3）通过杂交捕获法对核酸信号进行检测将所得RNA产物与标记有生物素的DNA探针一起加入到固相上进行杂交，所述固相上包被有识别DNA/RNA杂合体的特异抗体，RNA产物与DNA探针杂交形成DNA/RNA杂合体被固相上特异抗体捕获；向固相加入标记具有二次扩增能力的酶的亲和素或链霉亲和素，用于DNA探针上生物素的检测，然后通过化学发光显色实现核酸信号的获得。
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