[发明专利]离子排斥色谱法测定发酵酒中有机酸含量的方法

摘要

本发明提供一种离子排斥色谱法测定发酵酒中有机酸含量的方法，其只需将样品经过0.45μm滤膜过滤便可得待测液，即样品处理简单，利用H2SO4溶液-乙腈为流动相，并采用IC PAKTM ION Exclusion色谱柱，以0.5mL/min的流速进行梯度洗脱分离，能够在较短的时间内同时对样品中的13种有机酸的含量进行测定，而且流动相配制方便易操作，在检测有机酸的同时避免了现有技术中因使用磷酸盐而导致的可能析出造成的色谱柱和色谱系统堵塞污染的问题，另外，还具有检测准确定高、重复性好的特点，进而极大的节省了检测成本。

主权项

一种离子排斥色谱法测定发酵酒中有机酸含量的方法，其特征在于：该方法包括如下具体操作:（1）标准溶液的配制：分别称取草酸、马来酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、抗坏血酸、琥珀酸、乳酸、富马酸、乙酸、丙酸、异丁酸、及丁酸标样10mg并混合得混合物，之后采用超纯水对该混合物进行溶解并定容以获得标准溶液的母液，且该母液的浓度为1mg/mL，然后利用超纯水将母液稀释成不同浓度梯度的标准溶液，于‑40℃下保存备用；（2）样品处理：将酒的样品经过0.45μm滤膜过滤即得待测液；（3）离子排斥色谱检测：在色谱柱上，以体积比为98:2的H2SO4溶液‑乙腈为流动相，且以0.5mL/min的流速进行梯度洗脱分离，且色谱条件如下：色谱柱：IC PAKTM ION Exclusion；流动相：H2SO4溶液‑乙腈；柱温：55℃；检测波长：210nm；进样量：10μL；流动相中H2SO4溶液浓度的变化过程：0min～40min，H2SO4溶液的浓度由0.01mol/L等度梯度上升至0.02mol/L；40min～50min，H2SO4溶液的浓度为A0.01mol/L；（4）测定：分别取制备获得的标准溶液及待测液，并采用上述色谱条件进行进样检测，记录色谱图，经过色谱仪器自带软件积分得到峰面积，计算分别得到待测液中草酸、马来酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸、抗坏血酸、琥珀酸、乳酸、富马酸、乙酸、丙酸、异丁酸、及丁酸的含量。