[发明专利]一种肿瘤细胞系的构建方法有效
| 申请号： | 201310452611.5 | 申请日： | 2013-09-28 |
| 公开（公告）号： | CN103468746A | 公开（公告）日： | 2013-12-25 |
| 发明（设计）人： | 徐矫健;孙威 | 申请（专利权）人： | 青岛麦迪赛斯生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;C12R1/91 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 266111 山东省青岛市青岛高新技术产*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明的目的是提供一种可以高效刺激DC细胞致敏的抗原来源，即从肿瘤组织中分离得到肿瘤细胞，然后通过基因（bcl-2和erbB-1）的转染，使其形成个体化的肿瘤细胞系，从而达到可以连续多次、高效刺激致敏DC细胞，使其将抗原递呈T淋巴细胞后，产生高效特异性杀伤功能的CTL细胞的方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 肿瘤 细胞系 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种肿瘤细胞系的构建方法，包括如下的步骤：1）从肿瘤组织分离浓缩肿瘤细胞：用RPMI 1640培养基冲洗肿瘤组织；再用将肿瘤组织剪碎研磨后离心收集肿瘤细胞；用RPMI 1640培养基重悬肿瘤细胞制成细胞悬液；将细胞悬液加在肿瘤细胞分离液上，离心后从液体界面中间收集白色细胞层，将收集细胞用RPMI 1640培养基稀释后接种到细胞培养板中；2）基因转染：细胞贴壁后，将含有特定基因的慢病毒加入到细胞培养板中进行转染，病毒滴度大于107单位/毫升；3）将基因转染后的肿瘤细胞培养基进行培养，培养3‑5天后，将培养的肿瘤细胞用胰蛋白酶酶解，进行细胞传代建立肿瘤细胞系。
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