[发明专利]神经干细胞的制备方法有效
| 申请号： | 201310380429.3 | 申请日： | 2013-08-28 |
| 公开（公告）号： | CN104419661B | 公开（公告）日： | 2017-11-21 |
| 发明（设计）人： | 赵春华 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院基础医学研究所 |
| 主分类号： | C12N5/0797 | 分类号： | C12N5/0797;C12N5/0775;C12N5/0793;C12N5/079 |
| 代理公司： | 北京戈程知识产权代理有限公司11314 | 代理人： | 程伟 |
| 地址： | 100005*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明涉及神经干细胞的制备方法。具体而言，本发明公开了一种诱导人间充质干细胞获得神经干细胞的方法，将间充质干细胞在第一、第二、第三培养基中依次进行培养从而获得神经干细胞。最终获得的神经干细胞表达早期神经干细胞的标志，且能分化为有功能的神经元及神经胶质细胞。 | ||
| 搜索关键词： | 神经 干细胞 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种神经干细胞的制备方法，其包括步骤：1)获得间充质干细胞；2)将间充质干细胞在第一培养基中进行培养；3)之后转入第二培养基中进行培养；4)之后转入第三培养基中进行培养；5)获得神经干细胞，其中所述间充质干细胞是人脂肪来源的间充质干细胞；其中所述第一培养基由动物细胞基础培养基、150ml/L至250ml/L血清替代物、5ml/L至15ml/L非必须氨基酸、0.05mmol/L至0.15mmol/Lβ‑巯基乙醇、0.5mmol/L至1.5mmol/L L‑谷氨酰胺和0ng/ml至10ng/ml碱性成纤维细胞生长因子组成；所述第二培养基由动物细胞基础培养基、5ml/L至15ml/L N2添加剂、10ml/L至30ml/L B27添加剂、0.05mmol/L至0.15mmol/Lβ‑巯基乙醇和0.5mmol/L至1.5mmol/L L‑谷氨酰胺组成；所述第三培养基由动物细胞基础培养基、5ml/L至15ml/L N2添加剂、10ml/L至30ml/L B27添加剂、0.05mmol/L至0.15mmol/L β‑巯基乙醇、0.5mmol/L至1.5mmol/L L‑谷氨酰胺、15ng/ml至25ng/ml碱性成纤维细胞生长因子和15ng/ml至25ng/ml表皮细胞生长因子组成，其中所述第一培养基的动物细胞基础培养基为Knockout DMEM或Knockout DMEM/F12，所述第二培养基的动物细胞基础培养基为体积比为1：1的Neurobasal培养基与DMEM/F12培养基，以及所述第三培养基的动物细胞基础培养基为体积比为1：1的Neurobasal培养基与DMEM/F12培养基；并且，其中将所述间充质干细胞接种于所述第一培养基中，培养6至10天，将完成步骤2)的细胞转接于第二培养基中，培养5至9天，将完成步骤3)的细胞转接于第三培养基中，培养5至9天。
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