[发明专利]贻贝寡肽的制备方法及其应用

摘要

本发明公开了贻贝寡肽的制备方法及其应用，属于海洋生物技术应用领域。以紫贻贝为原料，采用碱性冷提法从贻贝冻干粉中获得贻贝蛋白；通过复合酶解蛋白得到混合多肽，超滤获得寡肽，采用衰老小鼠模型进行一系列抗衰老动物实验及行为学实验，并通过果蝇生存实验，证明该贻贝寡肽具有延缓衰老的活性，为实现贻贝的科学化、高值化利用开创了新途径。与现有技术相比，本发明的优点在于：提取制备了贻贝蛋白，采用最佳的蛋白酶和优选的工艺对贻贝蛋白进行酶解纯化，避免了高温对贻贝蛋白分子结构的分解，并使贻贝多肽在分子量水平上得到分级，从而使所得的贻贝寡肽延缓衰老的效果更纯更好。

主权项

贻贝寡肽的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：（1）制备贻贝冻干粉：取紫贻贝的新鲜贻贝肉，连同汁液迅速冷冻干燥粉碎后得到贻贝粉；（2）制备贻贝蛋白：将适量的贻贝粉，用0.2mol/L的NaOH溶液配成质量分数为1%的悬浮液，并用2mol/L的NaOH溶液调节pH值梯度为10‑12，4℃搅拌浸提60min；将浸提液于8000 r/min条件下4℃离心20min，收集上清液；将上述上清液，用2mol/L HCl调pH值为5‑6，沉淀5‑10分钟，8000 r/min，，4℃离心20min；分别收集上清夜和沉淀，沉淀冷冻干燥为贻贝蛋白粉；（3）制备贻贝寡肽：以贻贝蛋白粉于水中配成质量分数为2%的悬浮液，置于反应器中52.5 ℃水浴浸泡30分钟后，加入中性蛋白酶与复合风味酶组合同时水解；加入蛋白酶量各为4000U/g底物蛋白，为pH 6.0‑7.0条件下， 52.5℃水解2小时，煮沸10min灭酶；酶解液离心，取上清液分别采用10kDa、5kDa、3kDa、1kDa的超滤膜超滤；取小于1kDa滤液冷冻干燥，获得贻贝寡肽。