[发明专利]利用骨骼肌组织块培养获得骨骼肌细胞的方法

摘要

本发明公开了一种利用骨骼肌组织块培养获得骨骼肌细胞的方法，包括采样、剪切、摆布、培养，它的步骤如下：（1）采集骨骼肌组织块，剪切，摆布于培养瓶的瓶底；（2）翻转培养，将培养瓶的瓶底朝上，盖好瓶塞，放入培养箱中，在体积浓度为5%CO2、37℃的条件下培养2～3小时，然后从培养箱中取出培养瓶，开塞，46度左右斜持培养瓶，瓶底向上，向瓶底角部注入培养基，翻转培养瓶，培养基覆盖培养瓶上的骨骼肌组织块，再将培养瓶盖好瓶塞，放入培养箱中，在体积浓度为5%CO2、37℃的条件下静置培养，3～4天换培养基，6～8天长出细胞后，本发明通过培养背最长肌组织块，组织块培养9~10d细胞融合度可达到80%，得到骨骼肌细胞，细胞融合度达80%时，可作为传代之用，以建立稳定的细胞系。

主权项

利用骨骼肌组织块培养获得骨骼肌细胞的方法，包括采样、剪切、摆布、培养，其特征在于：它的步骤如下：（1）采集骨骼肌组织块，剪切，摆布于培养瓶的瓶底；（2）翻转培养，将培养瓶的瓶底朝上，盖好瓶塞，放入培养箱中，在体积浓度为5%CO2、37℃的条件下培养2～3小时，然后从培养箱中取出培养瓶，开塞，46度左右斜持培养瓶，瓶底向上，向瓶底角部注入培养基，所述培养基为含体积浓度为20%胎牛血清的DMEM/F12，翻转培养瓶，培养基覆盖培养瓶上的骨骼肌组织块，再将培养瓶盖好瓶塞，放入培养箱中，在体积浓度为5%CO2、37℃的条件下静置培养，3～4天换培养基，6～8天长出细胞后，培养基为含体积浓度为10%FBS的DMEM/F12。