[发明专利]一种基于微流控微珠阵列芯片的核酸检测方法有效

专利信息
申请号: 201310293950.3 申请日: 2013-07-12
公开(公告)号: CN103333967A 公开(公告)日: 2013-10-02
发明(设计)人: 张何;傅昕;刘涟;朱振军 申请(专利权)人: 湖南工程学院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/28
代理公司: 湘潭市汇智专利事务所 43108 代理人: 宋向红
地址: 411104 湖*** 国省代码: 湖南;43
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摘要: 发明公开了一种基于微流控微珠阵列芯片的核酸检测方法。本发明主要是:将特异性捕获探针和电子富集蛋白固定于微球表面形成功能化微球,并将该微球固定在微流控芯片检测区中;将辣根过氧化物酶和检测探针修饰到纳米颗粒上作为信号标记;将目标核酸序列及纳米颗粒流入微流控微珠阵列检测芯片的检测区与微珠阵列反应;通过多酶纳米信号放大技术将生物素化的酪胺结合到微球表面的电子富集蛋白上,洗脱后流入亲合素标记的量子点,该量子点能与微球表面电子富集蛋白上结合的生物素识别并固定,通过荧光进行定量检测。本发明能解决当前核酸分析方法中存在的灵敏度低、检测流程复杂及难以实现微量样品分析的问题,并促进该技术领域的进一步发展。
搜索关键词: 一种 基于 微流控微珠 阵列 芯片 核酸 检测 方法
【主权项】:
一种基于微流控微珠阵列芯片的核酸检测方法,其特征在于包括如下步骤:(1)通过生物素‑亲合素结合方法将设计的特异性捕获探针和电子富集蛋白固定于微球表面形成功能化微球,并将该微球固定在微流控芯片检测区的相应微结构中,形成微流控微珠阵列检测芯片;(2)将辣根过氧化物酶和检测探针修饰到纳米颗粒上作为信号标记;(3)将目标核酸序列及步骤(2)形成的功能化纳米颗粒流入微流控微珠阵列检测芯片的检测区与微珠阵列反应,功能化微球可以特异性地识别及捕获目标核酸序列,并与功能化纳米颗粒探针形成三明治结构;(4)通过多酶纳米信号放大技术将生物素化的酪胺结合到微球表面的电子富集蛋白上,洗脱后流入亲合素标记的量子点,该量子点能与微球表面电子富集蛋白上结合的生物素识别并固定,通过荧光进行定量检测。
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