[发明专利]一种提取棉花干种子基因组DNA的方法无效
| 申请号： | 201310272540.0 | 申请日： | 2013-07-01 |
| 公开（公告）号： | CN103382470A | 公开（公告）日： | 2013-11-06 |
| 发明（设计）人： | 郎需勇;游艾青;别传述;刘立清;刘定富;刘伟霞;杨亮 | 申请（专利权）人： | 湖北惠民农业科技有限公司;湖北省农业科学院粮食作物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 武汉荆楚联合知识产权代理有限公司 42215 | 代理人： | 王健 |
| 地址： | 430070 湖北省武汉市洪山*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种适用于棉花干种子基因组DNA快速提取的方法，包括步骤：1）取棉花干种子胚于200μL96孔PCR板中；2）向棉花干种子胚中加入DNA提取缓冲液，置于94℃15-20min；3）弃上清，重复步骤2）一遍；4）向棉花干种子胚中加入ddH2O稀释，即可用于PCR扩增分析。本发明方法从基因组DNA提取到SSR-PCR扩增，最后电泳，进行谱带分析，整个过程仅需4.5~5h。本发明提供的一种棉花干种子DNA快速提取方法，成本低、速度快、操作简单，适用于批量化DNA的提取，且整个提取过程无毒、无污染，是一种资源节约型和环境友好型的高效提取方法，适用于大批量样本的SSR分子标记鉴定工作。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提取 棉花 种子 基因组 dna 方法 | ||
【主权项】：
本发明的一种提取棉花干种子基因组DNA的提取方法，包括以下步骤：1) 取棉花干种子胚于200μL 96孔PCR板中；2) 向装有棉花干种子胚的PCR板的每个孔中加入50μL DNA提取缓冲液，然后于94℃保持 15~20min；3) 弃上清，重复步骤2）一遍得到棉花干种子基因组DNA原液；4) 向装有棉花干种子胚和提取缓冲液的PCR板的每个孔中加入150μL ddH2O稀释得到棉花干种子基因组DNA工作液；其中，步骤2）中的提取缓冲液：100mmol/L Tris，pH值8.0； 10mmol/L EDTA，pH值8.0；1mol/L KCl。
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