[发明专利]胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法无效
| 申请号： | 201310246009.6 | 申请日： | 2013-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN103275927A | 公开（公告）日： | 2013-09-04 |
| 发明（设计）人： | 张钰 | 申请（专利权）人： | 广东省实验动物监测所 |
| 主分类号： | C12N5/0735 | 分类号： | C12N5/0735;C12N5/073;C12N11/16 |
| 代理公司： | 东莞市中正知识产权事务所 44231 | 代理人： | 肖哲 |
| 地址： | 510000 广东省广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法。所述新型的小鼠胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法，饲养层细胞采用化学固定的方式制备。所述化学固定采用多聚甲醛（PA）作为固定剂。或者，所述化学固定采用戊二醛（GA）作为固定剂。整体培养过程包括如下步骤：（1）准备注射前将胚胎干细胞接种到饲养层细胞上，贴合度满足后进行一次传代；（2）注射前1天或注射当天将细胞用酶进行消化，然后离心收集细胞，吸出上清液后加培养基重悬；（3）冷藏或直接注射。进一步地，步骤（1）中贴合度为80%。相比于生物培养法，化学固定法能够提供质量稳定的ES细胞，可反复使用，而且饲养层细胞在消化处理时不会随着ES细胞脱落。 | ||
| 搜索关键词： | 胚胎 干细胞 及其 培养 饲养 细胞 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种新型的小鼠胚胎干细胞及其培养用饲养层细胞的制备方法，其特征在于：所述饲养层细胞采用化学固定的方式制备。
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