[发明专利]一种细胞培养用GF微载体及其制备方法有效
申请号: | 201310211566.4 | 申请日: | 2013-05-30 |
公开(公告)号: | CN103275923A | 公开(公告)日: | 2013-09-04 |
发明(设计)人: | 冯玉萍;马忠仁;李明生;田伟;马桂兰;暴艳敏 | 申请(专利权)人: | 冯玉萍 |
主分类号: | C12N5/07 | 分类号: | C12N5/07;C08J3/24;C08L89/00 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 高松 |
地址: | 730000 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | 本发明提供一种细胞培养用微载体,其制备方法如下:1)配制变性胶原或明胶溶胀液;2)油乳液制球:将无毒高密度油与异辛醇混合,搅拌制成油乳液,将胶液倒入油乳液中,形成微球;3)交联固定;4)凝固;5)除油;6)还原脱色:用B还原剂还原脱色,并中和多余的戊二醛;7)脱脂脱水:用梯度酒精脱脂脱水,完成制备。本发明的微载体具有下述优点:基质浓度高、无毒性、透明度和生物相容性好、可以采用高压灭菌、使用前不需对细胞培养容器预先硅化、工艺简单、使用方便、价格低廉,在搅拌状态下悬浮培养,细胞不容易脱落,适合于多种贴壁细胞的大规模微载体悬浮培养。 | ||
搜索关键词: | 一种 细胞培养 gf 载体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种细胞培养用GF微载体的制备方法,步骤如下:(1)配制胶液:使变性胶原或明胶溶胀,最终的质量浓度为5%‑20%;(2)油乳液制球:将无毒高密度油与异辛醇按适当比例混合,搅拌制成油乳液,并在搅拌状态下将胶液倒入油乳液中,形成微球;(3)交联固定:用戊二醛交联固定;(4)凝固:10℃以下或冰浴中静置;(5)除油:除去上清油乳液,将固形物用表面活性剂进行除油;(6)还原脱色:用硼还原剂还原脱色,并中和多余的戊二醛;(7)脱脂脱水:用梯度酒精进行脱脂脱水,并进一步固定,完成细胞培养用GF微载体的制备。
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