[发明专利]一种高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法

摘要

本发明涉及一种高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法，该方法包括三个步骤，第一制备支链淀粉回归方程和直链淀粉回归方程，第二计算支链淀粉的吸收比α和直链淀粉的吸收比β，第三样品测定，在该步骤中，通过给定公式计算支链淀粉和直链淀粉在测定波长的吸光度，然后再将相应的将吸收比和吸光度带入相应的回归方程中即得支链淀粉和直链淀粉的浓度。本发明提供的测定方法仅需两个波长，排除了双波长的零假设带来的误差，与双波长相比该方法的原理、计算方法更简单，且最终计算得到的直链淀粉和支链淀粉含量的精确度高。

主权项

1.一种高粱中支链淀粉和直链淀粉含量的测定方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：制备支链淀粉回归方程和直链淀粉回归方程，该步骤包括：S11：取支链淀粉纯品和直链淀粉纯品分别置于容器中，分别向两个容器中加入乙醇溶液进行分散处理，处理后加入氢氧化钠溶液混匀，封住容器口，沸水浴中搅拌使直链淀粉纯品和支链淀粉纯品完全溶解，然后使用蒸馏水定容即得支链淀粉初配溶液和直链淀粉初配溶液；S12：制备支链淀粉回归方程，取多份步骤S11中配置的支链淀粉初配溶液，调节该多份支链淀粉初配溶液的pH值至3～4，再加碘试剂，并用蒸馏水定容，最终得到支链淀粉浓度为40～90ug/mL的支链淀粉标准溶液系列，静置，以碘为空白，进行紫外扫描得到支链淀粉标准溶液系列中浓度不同的各份支链淀粉标准溶液对400～800nm波长紫外线的吸光度，然后以浓度不同的各份支链淀粉标准溶液的浓度为横坐标，以其吸光度为纵坐标制得支链淀粉标准曲线，根据支链淀粉标准曲线得到支链淀粉回归方程；S13：制备直链淀粉回归方程，取多份步骤S11中配置的直链淀粉初配溶液，调节该多份直链淀粉初配溶液的pH值至3～4，再加碘试剂，并用蒸馏水定容，最终得到直链淀粉浓度为6～26ug/mL的直链淀粉标准溶液系列，静置，以碘为空白，进行紫外扫描，得到直链淀粉标准溶液系列中浓度不同的各份直链淀粉标准溶液对400～800nm波长紫外线的吸光度，然后以浓度不同的各份直链淀粉标准溶液的浓度为横坐标，以其吸光度为纵坐标制得直链淀粉标准曲线，根据直链淀粉标准曲线得到直链淀粉回归方程；S2：计算支链淀粉的吸收比α和直链淀粉的吸收比β：将波长λ1作为支链淀粉的测定波长，波长λ2作为直链淀粉的测定波长，λ1和λ2为400～800nm的范围内，然后分别测定支链淀粉标准溶液系列和直链淀粉标准溶液系列中浓度不同的各份标准溶液在λ1及λ2处的吸光度，根据式（1）和（2）分别计算α_j和β_i，然后再对得到的多个α_j利用统计学求平均值得到支链淀粉的吸收比α，对得到的多个β_i利用统计学求平均值得到直链淀粉的吸收比β：其中，α_j表示支链淀粉标准溶液系列中第j份标准溶液中支链淀粉的吸收比，j∈(1,...,J)，J表示支链淀粉标准溶液系列中标准溶液的份数，A_jλ2^支表示支链淀粉标准溶液系列中第j份标准溶液在波长为λ2处的吸光度，A_jλ1^支表示支链淀粉标准溶液系列中第j份标准溶液在波长为λ1处的吸光度，β_i表示直链淀粉标准溶液系列中第i份标准溶液中直链淀粉的吸收比，i∈(1,...,I)，I表示直链淀粉标准溶液系列中标准溶液的份数，A_iλ1^直表示直链淀粉标准溶液系列中第i份标准溶液在波长为λ1处的吸光度，A_iλ2^直表示直链淀粉标准溶液系列中第i份标准溶液在波长为λ2处的吸光度；S3：样品测定：秤取经粉碎脱脂后的高粱淀粉样品，加入乙醇溶液进行分散处理，处理后加入氢氧化钠溶液混匀，然后在沸水浴中分散淀粉至均匀，冷却至室温后，使用蒸馏水定容得到高粱淀粉样品溶液；然后根据式（3）和（4）分别计算高粱淀粉样品溶液中支链淀粉在波长λ1处的吸光度A_λ1^直，直链淀粉在波长λ2处的吸光度A_λ2^支；最后将A_λ2^支代入支链淀粉回归方程即得高粱淀粉样品中支链淀粉的浓度，将A_λ1^直代入直链淀粉回归方程即得高粱淀粉样品中直链淀粉的浓度；其中，A_λ1^支+直表示高粱淀粉样品溶液在波长λ1处的总的吸光度，A_λ2^支+直表示高粱淀粉样品溶液在波长λ2处的总的吸光度。