[发明专利]一种甲基化DNA检测方法

摘要

本发明提供一种甲基化DNA检测方法，该方法有以下步骤：提取DNA、设计并合成探针、杂交反应、加入单克隆抗体反应、加入偶联单克隆抗体反应、加入检测试剂、测定并计算。本发明能够有效排除非甲基化DNA的影响，因此本发明具有检测特异性高、不容易被干扰、假阳性率低等优点，同时还具有适用范围大、方法简单、需要样本量小、适用混合样本等好处，在肿瘤早期检测、个性化治疗、病情判断和复发监控等方面有着重要的意义。

主权项

一种甲基化DNA检测方法，其特征在于，所述甲基化DNA检测方法包括以下步骤：步骤1，提取待测样品DNA；步骤2，确定待测基因的检测区域，在检测区域选择一段序列，以这一段序列的互补序列作为检测探针的序列，使这一段序列长18‑120碱基；对所设计并合成的探针的5’端进行标记；步骤3，用标准甲基化DNA和标准非甲基化DNA作为检测的阳性标准对照和阴性标准对照，作梯度稀释；用所述的检测探针与待测样品DNA、梯度稀释的标准DNA样品分别进行杂交反应；步骤4，将步骤3的反应物分别加入反应载体中，捕捉经过进行杂交反应的被标记的探针，并洗涤；步骤5，加入单克隆抗体，进行反应并洗涤；步骤6，加入偶联单克隆抗体，进行反应并洗涤；步骤7，加入HRP检测试剂进行反应；步骤8，终止反应并用酶标仪进行测定，计算甲基化DNA的浓度和量。