[发明专利]一种海黍子中抗肿瘤多糖组分的提取纯化方法

摘要

本发明涉及一种海黍子中抗肿瘤多糖组分的提取纯化方法，属于抗肿瘤多糖组分的提取纯化方法技术领域。一种海黍子中抗肿瘤多糖组分的提取纯化方法包括：（一）提取多糖粗品：海黍子清洗去杂、晾干并粉碎；冷浸、脱脂，室温晾干；抽提；再次抽提，合并抽提液；将上清液旋转蒸发，分级醇沉；（二）多糖粗品提纯：去除杂质；冻干粉配成水溶液层析，洗脱；层析，分级，得三个组分；相关药理学性质检测。本发明一种海黍子抗肿瘤多糖组分的提取纯化方法，获得一定范围内相对分子量且含有一定量硫酸基的多糖组分，具有较为显著的抗肿瘤作用，通过小鼠抗肿瘤实验得到多糖组分对小鼠的免疫系统具有调节作用，为开发无毒副作用的抗肿瘤药物奠定了基础。

主权项

一种海黍子中抗肿瘤多糖组分的提取纯化方法，其特征在于包括以下步骤：（一）提取多糖粗品：（1）海黍子清洗去杂、晾干并粉碎，并过100目筛；（2）将粉碎的海黍子粉末用四倍于其质量的90%的乙醇溶液中冷浸一周进行脱脂，室温晾干；（3）于取脱脂后的海黍子粉末中加入蒸馏水，在低于70℃的恒温水浴中抽提，取得抽提液；（4）抽提残渣加入蒸馏水在恒温水浴中再次抽提，合并抽提液，抽滤得上清液；（5）将上清液旋转蒸发至提取液呈黏稠状态，向提取液中加入无水乙醇至乙醇体积分数为30%，在4℃温度环境中置放4‑8h，过滤去除其中的沉淀，于上清液中加入无水乙醇至乙醇体积分数达到总体积的60%，过滤得到的沉淀即为海黍子褐藻硫酸多糖粗品；（二）多糖粗品提纯：（1）海黍子褐藻硫酸多糖粗品去除蛋白质、小分子等杂质，真空冷冻干燥；（2）将所得的冻干粉配成水溶液层析，分别用0.1M、0.5M、1M的Nacl溶液进行洗脱，得到不同硫酸基含量的三个组分S1、S2、S3；（3）对三个组分进行相关含量测定，并对其进行肿瘤抗性实验，对抗肿瘤活性最强的组分S2进行层析，根据不同分子量段进一步分级，得SKP1、SKP2、SKP3三个组分；（4）对SKP1、SKP2、SKP3三个组分进行抗肿瘤免疫相关的药理学性质检测，筛选得出具有极显著抗肿瘤活性的多糖组分SKP2。