[发明专利]一种促进干细胞粘附、迁移、归巢及血管新生的方法

摘要

本发明属于细胞生物学领域，涉及一种促进干细胞粘附、迁移、归巢及血管新生的方法。本发明方法从脂肪组织中利用胶原酶和酵素酶分离、筛选获得大量脂肪源细胞，同时采用纳米分子探针标记，MRI动态示踪其对不同时期血管损伤的修复，经体外实验验证了GFP-ADSCs能高表达periostin蛋白，periostin能调控脂肪干细胞粘附、迁移及低氧刺激下抗凋亡的能力；经体内实验显示了过表达periostin的ADSCs体内移植能促进缺血下肢血管新生。本发明方法能为临床实践中改善干细胞移植治疗严重肢体缺血性疾病的疗效提供新的参考策略和思路。

主权项

一种促进干细胞粘附、迁移、归巢及血管新生的方法，其特征在于，其包括：从脂肪组织中利用胶原酶和酵素酶分离、筛选获得脂肪源细胞，同时采用纳米分子探针标记，MRI动态示踪其对不同时期血管损伤的修复；其包括步骤：(1)用包括胶原酶和酵素酶的消化酶溶液分离、筛选获得干细胞或脂肪源细胞，对脂肪源细胞进行免疫荧光鉴定及流式分析鉴定；(2)以腺病毒为载体，采用基因转染的方式，periostin转染脂肪源细胞使脂肪源细过表达调控蛋白；(3)检测periostin调控干细胞或脂肪源细胞粘附、迁移及低氧刺激下抗凋亡的水平；(4)相关通路阻断剂共培养检测干细胞或脂肪源细胞迁移、诱导分化能力、低氧抗凋亡能力，测定periostin调控干细胞或脂肪源细胞的抗凋亡、促增殖、促迁移能力的变化；(5)检测获得的过表达periostin的干细胞或脂肪源细胞的存活及迁移浸润及促血管新生能力。