[发明专利]发酵方法无效
| 申请号： | 201280028718.0 | 申请日： | 2012-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN103620050A | 公开（公告）日： | 2014-03-05 |
| 发明（设计）人： | P.M.H.德霍泰;P.戈芬 | 申请（专利权）人： | 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C07K14/195;C07K14/34;A61K39/02 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 杜艳玲;王景朝 |
| 地址： | 比利时里*** | 国省代码： | 比利时;BE |
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| 摘要： | 本发明提供了用于细菌类毒素的周质表达的方法，包括步骤：a)在发酵培养基中培养革兰氏阴性宿主细胞的培养物，其中所述宿主细胞用多核苷酸转化，并且其中所述多核苷酸编码细菌类毒素和周质信号序列；或提供革兰氏阴性宿主细胞，其中所述宿主细胞用多核苷酸转化，并且其中所述多核苷酸编码细菌类毒素和周质信号序列并且其中所述革兰氏阴性宿主细胞包括在周质中表达的细菌类毒素；a(i))诱导所述细菌类毒素的表达；b)使所述宿主细胞成熟，其中所述成熟步骤包括：I)使宿主细胞接受pH休克；II)无补料添加孵育所述宿主细胞；和/或III)使宿主细胞接受低于-20℃的温度；和c)从所述宿主细胞提取细菌类毒素，其中所述提取方法包括渗透压休克。 | ||
| 搜索关键词： | 发酵 方法 | ||
【主权项】：
用于细菌类毒素的周质表达的方法，其包括步骤：a) 在发酵培养基中培养革兰氏阴性宿主细胞的培养物，其中所述宿主细胞用多核苷酸转化，并且其中所述多核苷酸编码细菌类毒素和周质信号序列；a(i))诱导所述细菌类毒素的表达；b) 使所述宿主细胞成熟，其中所述成熟步骤包括：I) 使宿主细胞接受pH休克；II) 无补料添加孵育所述宿主细胞；和/或III) 使宿主细胞接受低于‑20℃的温度；和c) 从所述宿主细胞提取细菌类毒素，其中所述提取方法包括渗透压休克。
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