[发明专利]基于化学发光法检测蛋白酶活性及其抑制剂活性的方法有效
| 申请号： | 201210567032.0 | 申请日： | 2012-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN103063657A | 公开（公告）日： | 2013-04-24 |
| 发明（设计）人： | 于聪;张青峰;李文英;陈健;王方远;王燕 | 申请（专利权）人： | 中国科学院长春应用化学研究所 |
| 主分类号： | G01N21/76 | 分类号： | G01N21/76 |
| 代理公司： | 长春菁华专利商标代理事务所 22210 | 代理人： | 王丹阳 |
| 地址： | 130022 吉林*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 基于化学发光法检测蛋白酶活性及其抑制剂活性的方法，涉及生物分析化学技术领域，解决了现有检测酶活性的方法存在的流路设计复杂、操作繁琐、检测灵敏度低和成本高的问题。基于化学发光法检测蛋白酶活性的方法为：步骤一、将血红素蛋白溶解于Tris-HCl缓冲溶液中，得到血红素蛋白溶液；步骤二、向步骤一中的血红素蛋白溶液中加入不同浓度的蛋白酶，形成反应体系；步骤三、将步骤二中的反应体系注入到流动注射化学发光流路中，与鲁米诺-过氧化氢检测体系发生化学发光反应，对蛋白酶活性进行检测。本发明的方法具有简便、快捷、高灵敏、低成本的优点，能够得到更低的检出限，对胰蛋白酶检出限可以达到1ng/mL。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 化学 发光 检测 蛋白酶 活性 及其 抑制剂 方法 | ||
【主权项】：
基于化学发光法检测蛋白酶活性的方法，其特征在于，该方法的条件和步骤如下：步骤一、将血红素蛋白溶解于Tris‑HCl缓冲溶液中，得到血红素蛋白溶液；步骤二、将步骤一中的血红素蛋白溶液预先于35～40℃水浴中温育3～10min，然后再向血红素蛋白溶液中加入不同浓度的蛋白酶，形成反应体系；步骤三、将步骤二中的反应体系注入到流动注射化学发光流路中，与鲁米诺‑过氧化氢检测体系发生化学发光反应，对蛋白酶活性进行检测。
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