[发明专利]一种以大肠杆菌外膜孔蛋白OmpW为靶点筛选药物的方法有效
| 申请号： | 201210275708.9 | 申请日： | 2012-08-06 |
| 公开（公告）号： | CN103031358A | 公开（公告）日： | 2013-04-10 |
| 发明（设计）人： | 潘建义;吴贤斌;邹海杰 | 申请（专利权）人： | 浙江理工大学 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02 |
| 代理公司： | 杭州杭诚专利事务所有限公司 33109 | 代理人： | 尉伟敏 |
| 地址： | 310018 浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种以革兰氏阴性菌外膜蛋白为靶点筛选药物的方法，尤其是涉及一种以大肠杆菌外膜孔蛋白OmpW为靶点筛选药物的方法，旨在为了解决现有技术的药物筛选方法可靠性差、效率低的不足，所述方法包括下列步骤：（1）基因的克隆及重组载体的构建；（2）重组载体的转化、筛选及诱导表达得高表达菌；（3）以高表达菌的外膜孔蛋白OmpW为靶点进行细胞水平的药物筛选。该方法具有操作简单、筛选可靠性好、效率高的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 大肠杆菌 外膜孔 蛋白 ompw 筛选 药物 方法 | ||
【主权项】：
一种以大肠杆菌外膜孔蛋白OmpW为靶点筛选药物的方法，其特征在于，所述方法包括下列步骤：（1）基因的克隆及重组载体的构建；（2）重组载体的转化、筛选和诱导表达得外膜孔蛋白OmpW高表达菌；（3）以高表达菌的外膜孔蛋白OmpW为靶点进行细胞水平的药物筛选，用50~80μg/ml的待筛选化合物作用于高表达菌，培养0.5‑1h，采用Western‑blot分析检测高表达菌的外膜孔蛋白OmpW的表达量变化，OmpW的表达量降低，待筛选化合物具有药物作用，OmpW的表达量不变或增加，待筛选化合物不具有药物作用。
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