[发明专利]免疫学测定方法和芯片

摘要

本发明提供一种免疫学测定方法和芯片，该免疫学测定方法适于在芯片上实施。免疫学测定方法为以下方法，在反应腔室（7）中得到测定对象抗原（2）与抗体（3）已结合的状态下的抗原抗体复合物后，通过使用样品溶液（8）洗涤反应腔室（7），将抗原抗体复合物和未与测定对象抗原结合的抗体分离。根据本发明，不使用处于不含有蛋白质等测定对象抗原的状态下的以Tris-HCl缓冲液为代表的洗涤液，就能够洗涤反应腔室，并能够以与使用洗涤液的情况相当的精度检测出反应测定对象抗原的量的信号。由此，不需要将洗涤液从芯片的外部供给或将洗涤液预先保持在芯片上，就能够容易地在芯片上实施免疫学测定方法。

主权项

一种免疫学测定方法，其为使用芯片测定样品溶液中含有的测定对象抗原的量的方法，该方法的特征在于：所述芯片具有反应腔室、洗涤液保持腔室、废液腔室、和注入所述样品溶液的注入孔，所述注入孔和所述反应腔室之间通过第一流路连接，所述注入孔和所述洗涤液保持腔室之间通过第二流路连接，所述洗涤液保持腔室和所述反应腔室之间通过第三流路连接，所述反应腔室和所述废液腔室之间通过第四流路连接，所述方法包括：从所述注入孔注入所述样品溶液，将所述样品溶液通过所述第一流路分配给所述反应腔室，并通过所述第二流路分配给所述洗涤液保持腔室的工序；在所述反应腔室内，使所述样品溶液中含有的测定对象抗原与抗体结合，得到抗原抗体复合物的结合工序，其中，该抗体为与所述测定对象抗原特异性结合的抗体；通过所述第三流路向所述反应腔室注入保持在所述洗涤液保持腔室中的所述样品溶液，并对具有所述抗原抗体复合物的所述反应腔室进行洗涤，由此，将选自i)所述抗原抗体复合物、和ii)未与所述测定对象抗原结合的所述抗体中的一方残留在所述反应腔室内，并将另一方移动至所述废液腔室，将所述抗原抗体复合物和未与所述测定对象抗原结合的所述抗体分离的工序；对所述抗原抗体复合物或未与所述测定对象抗原结合的所述抗体的量进行测定的工序；和根据测得的所述抗原抗体复合物或未与所述测定对象抗原结合的所述抗体的量，计算出所述样品溶液中含有的所述测定对象抗原的量的工序，在所述反应腔室内固定有固相抗体，在所述结合工序中，使所述 固相抗体与所述测定对象抗原结合，进一步，使所述抗体的一部分与处于与所述固相抗体结合的状态的所述测定对象抗原结合，所述抗原抗体复合物是所述固相抗体、所述测定对象抗原和所述抗体的结合物，在进行所述分离的工序中，将所述抗原抗体复合物残留在所述反应腔室内，并将未与所述测定对象抗原结合的所述抗体移至所述废液腔室。