[发明专利]一种由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法无效
申请号: | 201210213231.1 | 申请日: | 2012-06-26 |
公开(公告)号: | CN102747033A | 公开(公告)日: | 2012-10-24 |
发明(设计)人: | 周向荣;邓铭权;陈庭鹏 | 申请(专利权)人: | 亚太干细胞科研中心有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;C12N5/071 |
代理公司: | 深圳市合道英联专利事务所(普通合伙) 44309 | 代理人: | 廉红果 |
地址: | 中国香港科技园二期科技大道西*** | 国省代码: | 中国香港;81 |
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摘要: | 本发明提供一种安全、简单的间充质干细胞和成纤维细胞的培养方法,能通过从活体牙龈中抽取的牙龈组织培养出间充质干细胞和成纤维细胞,该方法能容许组织样本被长距离运输,而不受地域的界限;且提取出来的成纤维细胞及间充质干细胞的纯度及一致性比起现有技术要高。 | ||
搜索关键词: | 一种 牙龈 组织培养 间充质 干细胞 纤维 组织 方法 | ||
【主权项】:
一种由牙龈组织培养间充质干细胞和成纤维组织的方法,其特征在于,所述培养方法包括以下步骤:a.从活体牙龈中抽取牙龈组织,将牙龈组织置于组织保持液中保存,所述组织保持液包含有MEM培养基底液、牛血清、抗生素和抗真菌素;b.以磷酸盐缓冲液对所述牙龈组织进行清洗,再加入胶原蛋白酶对所述牙龈组织进行消化;c.对消化后的混合液进行离心分离,得到细胞团;d.将上述细胞团置于含有MEM培养基底液的培养瓶中培养,收集培养得到的细胞并将所述细胞悬浮于磷酸盐缓冲液中;e.在步骤d的磷酸盐缓冲液中加入带有磁铁的成纤维细胞抗体,混合后静置反应;f.将步骤e反应后的产物置于磁化细胞分离器的分离管中,加入磷酸盐缓冲液进行分离,收集磁化细胞分离器的洗脱物即为间充质干细胞;g.取出所述分离管,加入磷酸盐缓冲液到分离管中,利用柱塞将分离管中的细胞压出,收集得到的细胞即为成纤维细胞。
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