[发明专利]电场作用下用微孔阵列固液相捕获单分子模板DNA的方法无效
申请号: | 201210175408.3 | 申请日: | 2012-05-31 |
公开(公告)号: | CN103451265A | 公开(公告)日: | 2013-12-18 |
发明(设计)人: | 杨楠;艾洪新;臧伯玮;何越 | 申请(专利权)人: | 凯晶生物科技(苏州)有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 范晴 |
地址: | 215123 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种电场作用下用微孔阵列固液相捕获单分子模板的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:(1)构建具有微孔阵列的DNA电化学传感器,所述微孔阵列的微孔侧壁上的SiO2绝缘层通过羧基偶联固定P1接头DNA片段;(2)在模板DNA的单链末端连接有与P1接头DNA片段互补配对的P1接头互补DNA片段,对模板DNA进行PCR扩增;(3)通过电场作用使PCR扩增后的模板DNA进入微孔中与固定在微孔阵列的侧壁上P1接头DNA片段进行互补配对连接,完成单分子模板DNA的捕获。该方法省去了注水到油形成微囊反应器的步骤,并减少了微珠的应用及富集步骤,节省了实验所用的试剂及实验成本,使微孔的有效利用率达到80%左右。 | ||
搜索关键词: | 电场 作用 微孔 阵列 固液相 捕获 分子 模板 dna 方法 | ||
【主权项】:
一种电场作用下用微孔阵列固液相捕获单分子模板DNA的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:(1)构建具有微孔阵列的DNA电化学传感器,所述微孔阵列的微孔侧壁上的SiO2绝缘层通过羧基偶联固定P1接头DNA片段;(2)在模板DNA的单链末端连接有与P1接头DNA片段互补配对的P1接头互补DNA片段,对模板DNA进行PCR扩增;(3)通过电场作用使PCR扩增后的模板DNA进入微孔中与固定在微孔阵列的侧壁上P1接头DNA片段进行互补配对连接,完成单分子模板DNA的捕获。
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