[发明专利]从鸡蛋清中联合提取多种蛋白质的方法

摘要

本发明公开了一种从鸡蛋清中联合提取多种蛋白质的方法，通过聚乙二醇8000分级沉淀蛋白质，然后采用Q Sepharose FF阴离子交换层析进行分离，可以一次性获得卵粘蛋白、溶菌酶、卵转铁蛋白、卵清蛋白和卵黄素蛋白，且蛋白质产品纯度高，回收率较好，该方法仅需常用层析填料即可进行，大幅度缩减了生产成本，为蛋清中蛋白质提取的大规模工业生产提供了有利条件。

主权项

一种从鸡蛋清中联合提取多种蛋白质的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：(1)新鲜鸡蛋清用等体积20～100mM氯化钠溶液稀释后混匀，调节pH值至5.0～8.0，得到处理好的蛋清稀释液；(2)向蛋清稀释液中，边搅拌边加入聚乙二醇8000至其在蛋清稀释液中质量百分比浓度为2～6％，充分搅拌2～12小时后离心分离，得到沉淀A和上清A，在上清A中继续添加聚乙二醇8000至其在上清A中质量百分比浓度为8～12％，充分搅拌2～12小时后离心，得到沉淀B和上清B，上清B中再继续添加聚乙二醇8000至其在上清B中质量百分比浓度为14～18％，充分搅拌2～12小时后离心，得到沉淀C和上清D；(3)将沉淀A悬浮于200～800mM氯化钠溶液中，充分搅拌悬浮4～24小时后离心，所得沉淀A1悬浮于蒸馏水中，充分搅拌后离心，再悬浮于蒸馏水中并离心一次，以洗去氯化钠，收集沉淀，即得卵粘蛋白；(4)沉淀B、C和上清D分别使用Q Sepharose FF阴离子交换层析进行分离，然后分别用氯化钠溶液分步洗脱，所得各洗脱峰分别收集，透析后冷冻干燥得到多个待鉴定的蛋白质产品；(5)对多个待鉴定的蛋白质产品进行取样，并经SD S‑聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定后，合并相同蛋白质产品，即得溶菌酶、卵转铁蛋白、卵清蛋白和卵黄素蛋白。