[发明专利]原位化学发光底物和测定

摘要

在水性条件或其它测定条件中原位产生化学发光的酶底物的方法。也公开了使用所述底物产生光、检测和/或量化酶、抗原和/或核酸的方法。还公开了与这些方法有关的试剂盒。

主权项

1.一种用于产生光的方法，所述方法包括下述步骤：(a) 提供氧化剂；(b) 提供具有下述结构的烯醇醚：其中，A和B独立地选自：含有1-20个碳原子的直链烷基、含有2-20个碳原子的直链烯基、含有3-20个碳原子的支链烷基、含有3-20个碳原子的支链烯基、含有3-20个碳原子的环烷基、含有3-20个碳原子的环烯基、含有3-20个碳原子的环杂烷基、含有3-20个碳原子的环杂烯基、含有4-60个碳原子的聚环烷基、含有4-60个碳原子的聚环烯基、含有4-60个碳原子的聚环杂烷基和含有4-60个碳原子的聚环杂烯基，它们中的任一个可以是未被取代的，或被一个或多个电子活性基团、增溶基团或光增强基团取代，且其中A和B一起形成所述环烷基、环烯基、聚环烷基或聚环烯基，所述环烷基、环烯基、聚环烷基或聚环烯基的碳原子之一是形成所述烯醇醚的双键的2个碳原子中的一个，R₁是含有1-20个碳原子的烷基、含有6-14个碳原子的芳基、含有7-15个碳原子的芳烷基、含有4-20个碳原子的杂芳基或含有5-20个碳的杂芳烷基，T是能够发射光的芳基或杂芳基环，且R₂是酶可切割的基团，其含有可被酶部分切割以在T上产生氧阴离子的键；(c) 组合水性溶液、所述氧化剂和所述烯醇醚，以形成包含1,2-二氧杂环丁烷酶底物的水性溶液；(d) 提供酶复合物，所述酶复合物包含能够切割所述1,2-二氧杂环丁烷酶底物的酶部分；(e) 使所述酶复合物与所述包含1,2-二氧杂环丁烷酶底物的水性溶液接触，以形成反应混合物；和，(f) 使所述反应混合物产生光。