[发明专利]植物基因组改造中常用的在核苷酸序列上修饰植物基因组的方法和工具

摘要

提供了以定向的方式修饰包含嵌合基因的转基因植物的植物基因组的方法和工具，其中所述嵌合基因具有植物分子生物学中常用的DNA元件。提供了重新设计的大范围核酸酶，用于切割此类常用于植物分子生物学中的元件。

主权项

1.向植物细胞的基因组的预定位点导入外来DNA分子的方法，包括步骤：a.在所述预定位点诱导双链DNA断裂；b.将所述外来DNA分子导入所述植物细胞中；和c.选择在所述预定位点导入了所述外来DNA的植物细胞；特征是所述预定位点是不同于天然存在的大范围核酸酶识别位点的核苷酸序列并且是编码吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)编码的膦丝菌素乙酰转移酶的DNA区域的核苷酸序列，且所述双链DNA断裂的诱导是通过导入非天然存在的单链大范围核酸酶或成对非天然存在的大范围核酸酶，所述大范围核酸酶识别或一致识别所述预定位点并诱导所述双链断裂，其中所述编码吸水链霉菌编码的膦丝菌素乙酰转移酶的DNA区域是bar编码区，其中所述预定位点包含SEQ ID No.1或SEQ ID No.2的核苷酸序列，并且其中所述成对大范围核酸酶分别包含SEQ ID No.5和SEQ ID No.6的氨基酸序列，或所述单链大范围核酸酶包含SEQ ID No.18的自第1至167位和自第206至362位的氨基酸序列。