[发明专利]一种人原代肿瘤细胞分离与培养试剂盒无效
申请号: | 201110447429.1 | 申请日: | 2011-12-28 |
公开(公告)号: | CN102604895A | 公开(公告)日: | 2012-07-25 |
发明(设计)人: | 丁国平;曹利平 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C12N5/09 | 分类号: | C12N5/09 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 张法高;赵杭丽 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供一种人原代肿瘤细胞分离与培养试剂盒,由包装盒、6孔细胞培养板、清洗液、胰酶消化液、胶原酶-透明质酸酶消化液、细胞分离液、肿瘤选择性培养液、使用说明书组成。其中清洗液是含青霉素400U/mL、链霉素400ug/mL的无菌RPMI1640细胞培养液。本发明克服当前原代肿瘤细胞培养过程复杂、所得肿瘤纯度不高、易受细胞污染的问题。本发明设计合理,在进行体外原代肿瘤细胞的分离与培养过程中受细菌污染的机会少,仅需要少量离心管等其它常用耗材,因此使用简单方便,培养的肿瘤细胞纯度更高、效果好。 | ||
搜索关键词: | 一种 人原代 肿瘤 细胞 分离 培养 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种人原代肿瘤细胞分离与培养试剂盒,由包装盒(1)、6孔细胞培养板(2)、清洗液(3)、胰酶消化液(4)、胶原酶-透明质酸酶消化液(5)、细胞分离液(6)、肿瘤选择性培养液(7)、使用说明书(8)组成;其中所述清洗液(3)是含青霉素400U/mL、链霉素400ug/mL的无菌RPMI 1640细胞培养液;胰酶消化液(4)是用无菌超纯水配制含0.1%胰蛋白酶、10g/L聚乙烯吡咯烷酮的胰酶消化液;胶原酶-透明质酸酶消化液(5)是用RPMI 1640细胞培养液配制,胶原酶终浓度为2g/L,透明质酸酶终浓度为2g/L;细胞分离液(6)是将纯percoll分离液与10倍PBS缓冲液以体积比为9:1比例混合后再与1倍PBS液以体积比为7:3比例混匀后制备密度为1.09的细胞分离液;肿瘤选择性培养液(7)是在RPMI 1640细胞培养液中添加10%新生胎牛血清、青霉素100U/mL、链霉素100ug/mL、胰岛素5ug/mL、氢化可的松2ug/mL、人重组表皮生长因子5ng/mL。
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