[发明专利]用于外源蛋白可溶性表达的质粒及其制备和应用方法无效

专利信息
申请号: 201110446386.5 申请日: 2010-08-31
公开(公告)号: CN102533835A 公开(公告)日: 2012-07-04
发明(设计)人: 张大兵;梁婉琪;袁政;申慧峰 申请(专利权)人: 上海交通大学
主分类号: C12N15/70 分类号: C12N15/70;C12N15/67;C12N15/64;C12R1/19
代理公司: 上海旭诚知识产权代理有限公司 31220 代理人: 郑立
地址: 200240 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 一种生物工程技术领域的用于外源蛋白可溶性表达的质粒及其制备和应用方法,该质粒为pET30e,其DNA序列如Seq ID No.1所示;通过将质粒模板与引物组进行PCR扩增后获得的扩增产物与pMD18-T载体连接,经转化大肠杆菌DH5α后获得大肠杆菌克隆体,将大肠杆菌克隆体作为底物进行酶切连接后将得到的产物转化大肠杆菌DH5α,获得可溶性表达质粒分子;应用方法:将获得的表达质粒分子,用热激法转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞得到重组大肠杆菌菌落,经接种培养得到菌体细胞后实现可溶性表达的提高。本发明对于帮助外源蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达具有促进作用,对进一步的分析这些蛋白的功能具有重要的意义。
搜索关键词: 用于 蛋白 可溶性 表达 质粒 及其 制备 应用 方法
【主权项】:
一种用于外源蛋白可溶性表达的表达载体,其特征在于,所述表达载体包含有分子伴侣FaeE的编码序列。
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