[发明专利]检测基因点突变的液相芯片和方法有效
申请号: | 201110334842.7 | 申请日: | 2011-10-28 |
公开(公告)号: | CN103103248A | 公开(公告)日: | 2013-05-15 |
发明(设计)人: | 程昌明 | 申请(专利权)人: | 上海生物芯片有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N21/64 |
代理公司: | 上海序伦律师事务所 31276 | 代理人: | 周东萍 |
地址: | 201203 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种检测基因点突变的液相芯片,包括:针对基因突变位点设计的引物对、微球、以及信号报告分子,该引物对中,正向引物3’端最后一个碱基与待检测基因突变位点的碱基互补,与野生型基因不互补,该正向引物序列中还人工引入的一个与突变型和野生型基因均不互补的碱基,该正向引物与微球通过连接臂相连接;反向引物与突变型基因完全互补,其5’端标记有信号报告分子。本发明还公开了检测基因点突变的方法,包括步骤:针对基因突变位点设计上述引物对;用该引物对在油包水乳液中对待检测突变基因进行扩增;检测微球表面的荧光信号。本发明检测基因点突变的液相芯片和方法,显著提高了大量野生型基因背景下低丰度基因点突变的检测灵敏度。 | ||
搜索关键词: | 检测 基因 突变 芯片 方法 | ||
【主权项】:
一种检测基因点突变的液相芯片,其特征在于,包括:针对基因突变位点设计的引物对、微球、以及信号报告分子;所述引物对中的正向引物具有下述式I所示的结构:5’‑S2‑B2‑S1‑B1‑3’(式I),式I中,B1表示正向引物3’端最后一个碱基,该碱基与待检测基因突变位点的碱基互补,与野生型基因不互补;B2表示人工引入的一个与突变型和野生型基因均不互补的碱基;S1表示与突变型基因互补的结合区3’端序列,长度为0‑4bp;S2表示与突变型基因互补的结合区5’端序列,长度为10‑39bp;该正向引物5’端设有连接臂,用于与微球相连接;所述引物对中的反向引物与突变型基因完全互补,其5’端标记有信号报告分子。
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