[发明专利]利用微流控芯片筛选蛋白质的核酸适体的方法

摘要

本发明公开了一种利用微流控芯片筛选蛋白质的核酸适体的方法，包括以下步骤：将预先设定的起始核酸文库先与非靶标蛋白质孵育，得到优化核酸文库；然后将靶标蛋白质先与微珠孵育，将修饰有靶标蛋白质的微珠置入一微流控芯片通道内；再将优化核酸文库通入微流控芯片通道内，经过冲洗、洗脱，得到初筛核酸文库；对初筛核酸文库进行PCR扩增，扩增产物通过亲和柱分离，变性解链、脱盐后形成次一级核酸文库；以次一级核酸文库替代起始核酸文库并重复前述步骤，直至得到含目标核酸适体的核酸文库。本发明的方法具有通用性强、筛选时间短、筛选效率高、筛选效果好等优点。

主权项

一种利用微流控芯片筛选靶标蛋白质特异性核酸适体的方法，包括以下步骤：（1）优化核酸文库：将预先设定的起始核酸文库先与非靶标蛋白质孵育，得到用于靶标蛋白核酸适体筛选的优化核酸文库；（2）修饰微珠：将所述靶标蛋白质先与微珠孵育，将修饰有靶标蛋白质的微珠置入一微流控芯片通道内；（3）初筛：将所述优化核酸文库通入所述微流控芯片通道内，该通道内的微珠上修饰的靶标蛋白质与所述优化核酸文库中部分核酸分子结合，经过在该微流控芯片通道内的冲洗、洗脱，得到与所述靶标蛋白质结合的初筛核酸文库；（4）纯化：将上述得到的初筛核酸文库进行PCR扩增，扩增产物通过链霉亲和素微珠填充的亲和柱进行分离，再通过碱变性解链、脱盐后形成次一级核酸文库；（5）循环：以上述得到的次一级核酸文库替代所述起始核酸文库并重复上述的步骤（1）～步骤（4），直至得到包含有能与所述靶标蛋白质特异性结合的核酸适体的核酸文库。