[发明专利]一种含有完全皮肤附属器的组织工程皮肤的构建方法

摘要

本发明涉及分子生物学组织工程皮肤研究领域。具体说来，本发明涉及一种运用组织工程化方法在体外建立含有全部皮肤附属器的全层三维皮肤的方法。

主权项

一种构建含有全部皮肤附属器的全层三维皮肤模型的方法，其特征在于所述的方法是以干细胞和再生医学与组织工程化技术方法为手段，在体外将皮肤全层包括皮肤附属器(毛囊、汗腺、皮脂腺)的所有类型细胞以及生物支架材料复合构建出具有与正常皮肤结构形态相似皮肤的方法，包括以下步骤：a)作为细胞微载体和生长因子释放载体的微球制备；b)分离并培养皮肤表皮、真皮以及皮肤附属器细胞，或者经过体外诱导能够生成皮肤附属器细胞的所有成体干细胞(包括来自于自体、同种异体等)；c)将所述微球载体和培养的不同细胞分别进行复合共培养；d)将经共培养得到的各种细胞微载体复合体按你不同比例与接种表皮细胞和真皮细胞的含基质成分的凝胶混合，并按照三维模式继续培养；e)对所构建的组织工程皮肤作形态学观察，进行HE染色，观察所构建的皮肤结构以及各种皮肤附属器细胞的形成情况；用免疫荧光染色法检测所构建的组织工程皮肤中皮肤附属器细胞标志物的表达。