[发明专利]一种利用猪血制备凝血酶的方法无效
申请号: | 201010230028.6 | 申请日: | 2010-07-19 |
公开(公告)号: | CN102337255A | 公开(公告)日: | 2012-02-01 |
发明(设计)人: | 宋古全;张立娟;朱稀檩;王雅静 | 申请(专利权)人: | 天津宝迪农业科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/74 | 分类号: | C12N9/74 |
代理公司: | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人: | 董一宁 |
地址: | 301800*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 一种利用猪血制备凝血酶的方法,依照下列步骤进行:(1)向猪血中加入抗凝剂,离心分离,取上层的抗凝血浆;(2)向抗凝血浆中加入1.0mol/L BaCl2溶液,依次进行搅拌、静置、离心,然后弃上清;(3)将步骤(2)中的沉淀依次通过洗涤、离心后,弃上清;(4)将步骤(3)中的沉淀用0.2mol/L EDTA,pH5.3溶解,调pH至5.3,然后静置、离心、弃上清;(5)将步骤(4)中的沉淀用EDTA进行溶解吸附,用Ca2+激活凝血酶原,得凝血酶原溶液,再将凝血酶原溶液的pH调至7.1,室温静置2-3h,过滤即得凝血酶溶液。该方法操作简便,生产周期短,易于工业化生产,制备出的凝血酶纯度高。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 猪血 制备 凝血酶 方法 | ||
【主权项】:
一种利用猪血制备凝血酶的方法,其特征在于:依照下列步骤进行:(1)向猪血中加入抗凝剂,离心分离,取上层的抗凝血浆;(2)向抗凝血浆中加入BaCl2溶液后依次进行搅拌、静置、离心,然后弃上清;(3)将步骤(2)中的沉淀依次通过洗涤、离心后,弃上清,重复洗1‑2次或多次;(4)将步骤(3)中的沉淀用pH为5.3的EDTA溶解,调pH至5.3,然后静置、离心、弃上清;(5)将步骤(4)中的沉淀用生理盐水溶解,得凝血酶原溶液,凝血酶原溶液用2%Na2CO3溶液调pH至7.1,加入凝血酶原的活化剂,使Ca2+终浓度为0.02‑0.04mol/L,再用2%Na2CO3溶液将凝血酶原溶液的pH调至7.1,室温静置2‑3h,过滤即得凝血酶溶液;(6)将凝血酶溶液冻干,即得凝血酶产品。
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