[发明专利]降低了高表达基因来源的cDNA克隆含有率的cDNA文库的制备方法有效
申请号: | 200980132279.6 | 申请日: | 2009-08-25 |
公开(公告)号: | CN102124106A | 公开(公告)日: | 2011-07-13 |
发明(设计)人: | 大床国世;杉山雅英;加藤诚志 | 申请(专利权)人: | 株式会社日立高新技术;国立残疾人康复中心总长代表的日本政府 |
主分类号: | C12N15/09 | 分类号: | C12N15/09;C40B40/06 |
代理公司: | 北京银龙知识产权代理有限公司 11243 | 代理人: | 钟晶;陈彦 |
地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
权利要求书: | 查看更多 | 说明书: | 查看更多 |
摘要: | 本发明提供一种有效地制备降低了高表达基因来源的cDNA克隆含有率的cDNA文库的方法。在使用具有寡脱氧胸苷酸的双链DNA引物、并且以mRNA为模板的cDNA文库的制备方法中,通过使具有结合到高表达的目的基因的mRNA、且阻止由逆转录酶而引起的cDNA延伸反应的特性的探针共存,从而降低cDNA文库中高表达基因来源的cDNA克隆的比例。 | ||
搜索关键词: | 降低 表达 基因 来源 cdna 克隆 含有 文库 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种制备降低了目的基因来源的cDNA克隆含有率的cDNA文库的方法,其特征在于,包括:(i):使双链DNA引物与含有在5’端具有帽状结构的mRNA的RNA混合物进行退火,进一步与至少一种结合到所述目的基因的mRNA上且抑制逆转录酶反应的探针进行退火的工序;(ii):通过逆转录酶由双链DNA引物合成第一链cDNA,制作mRNA/cDNA异源双链和双链DNA引物的连接体的工序;和(iii):将mRNA/cDNA异源双链和双链DNA引物的连接体的含有cDNA的DNA链的3’端和5’端用连接酶进行连接,使其环状化的工序。
下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于株式会社日立高新技术;国立残疾人康复中心总长代表的日本政府,未经株式会社日立高新技术;国立残疾人康复中心总长代表的日本政府许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服】
本文链接:http://www.vipzhuanli.com/patent/200980132279.6/,转载请声明来源钻瓜专利网。