[发明专利]一种串联表达小干扰RNA重组慢病毒载体的构建方法无效
| 申请号： | 200910062850.3 | 申请日： | 2009-06-26 |
| 公开（公告）号： | CN101684478A | 公开（公告）日： | 2010-03-31 |
| 发明（设计）人： | 郭德银;柳叶;陈宇;申彦森 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 43007*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种串联表达siRNA重组慢病毒载体的构建方法，主要步骤如下：(1)单靶点的siRNA重组慢病毒载体的构建：a.化学合成寡核苷酸链；b.有义链、反义链退火；c.退火片段连接至载体(2)双靶点的siRNA重组慢病毒载体的构建：a.利用PCR从单靶点的siRNA重组慢病毒载体中扩增U6/H1-siRNA表达框；b.将表达框连接至经XhoI酶切的单靶点的siRNA重组慢病毒载体；c.酶切鉴定筛选表达框正向插入的克隆；(3)多靶点的串联siRNA重组慢病毒载体的构建：将U6/H1-siRNA表达框插入至双靶点的siRNA重组慢病毒载体，构建出三靶点的siRNA重组慢病毒载体，同法可获得多靶点串联的siRNA重组慢病毒载体。本发明适用于同时表达针对多个靶基因的siRNA，适用于长期沉默多个靶基因的研究。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 串联 表达 干扰 rna 重组 病毒 载体 构建 方法 | ||
【主权项】：
1、一种改造的慢病毒载体pLLU6，其特征在于：Escherichia coli Stbl3/pLLU6CCTCC M 209135。
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