[发明专利]人卵巢癌肿瘤标志物HE4酶联免疫诊断试剂盒

摘要

本发明公开了一种人卵巢癌肿瘤标志物HE4酶联免疫诊断试剂盒，其制备方法及用途。通过合成的HE4基因引物，采用重叠PCR方法全人工合成HE4基因；将该基因构建到pGEX-4T1表达载体中并进行蛋白表达；表达的HE4融合蛋白经酶切纯化后得到HE4纯品，并以此免疫动物，获得多克隆抗体及单克隆抗体；用兔抗人HE4多克隆抗体包被ELISA板并进行封闭，以此兔多克隆抗体为捕获抗体，以辣根过氧化物酶标记的鼠抗人HE4单克隆抗体为检测抗体，装配成检测HE4的双抗体夹心ELISA试剂盒。本试剂盒特点在于检测灵敏度高、特异性强，适于卵巢癌的早期诊断，为卵巢癌病人疗效观察及预后判断提供一种简便快捷、经济可靠的检测方法。

主权项

1、一组HE4基因合成引物，其特征是：根据GenBank中人HE4基因序列并结合大肠杆菌偏爱密码子设计并合成PCR引物，PCR引物核苷酸序列组成：P1：tggttgtgctactttttgttctttacctaatgataaagaaggttcttgtcP2：ctaattgaggaaaattaatattaacttgaggacaagaaccttctttatcaP3：tctgaatgtgctgataatttaaaatgttgttctgctggttgtgctactttP4：ttgagaatcaacttgacattgatcacgacataaacctaattgaggaaaatP5：ctgatcaaaattgtactcaagaatgtgtttctgattctgaatgtgctgatP6：caaccattacgacaacatttcatttgaccaggacattgagaatcaacttgP7：cgggatccgaaaaaactggtgtttgtcctgaattacaagctgatcaaaattgtaP8：ccgctcgagttattaaaaattaggagtaacacaagaaactttaccacaaccattacgacaa。