[发明专利]稳定表达T7 RNA聚合酶的ST细胞系及其构建方法和应用无效
申请号: | 200810093214.2 | 申请日: | 2008-04-23 |
公开(公告)号: | CN101285054A | 公开(公告)日: | 2008-10-15 |
发明(设计)人: | 仇华吉;祁巧芬;孙元;李娜 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N9/00;C12N15/52;C12N15/85 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 | 代理人: | 孙皓晨;费碧华 |
地址: | 150001黑龙江*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明公开了一株稳定表达T7 RNA聚合酶的细胞系ST/T7,其微生物保藏号是:CGMCC No.2444。本发明将T7 RNA聚合酶基因插入到真核表达载体pIRES2-EGFP中,得到pIRES2-EGFP-T7,转染ST细胞,筛选得到稳定表达T7 RNA聚合酶的细胞系ST/T7。通过RT-PCR检测,可以从ST/T7细胞系中扩增到T7 RNA聚合酶基因的转录产物,用含有T7启动子控制下的红色荧光蛋白基因的表达质粒转染该细胞系,可观察到红色荧光蛋白的表达。本发明ST/T7细胞系能反式提供T7 RNA聚合酶,可用于猪瘟病毒等一些正链RNA病毒的反向遗传操作,还可作为体外转录表达系统,用于研究基因的结构与功能。 | ||
搜索关键词: | 稳定 表达 t7 rna 聚合 st 细胞系 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
1、一株稳定表达T7RNA聚合酶的细胞系ST/T7,其微生物保藏号是:CGMCC No.2444。
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