[发明专利]用抑肽酶为配基的亲和层析纯化糜蛋白酶的方法无效
| 申请号： | 200610030122.0 | 申请日： | 2006-08-16 |
| 公开（公告）号： | CN101126084A | 公开（公告）日： | 2008-02-20 |
| 发明（设计）人： | 章海峰 | 申请（专利权）人： | 上海第一生化药业有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/64 | 分类号： | C12N9/64 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 | 代理人： | 王巍 |
| 地址： | 200240上*** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种采用抑肽酶为配基的亲和层析纯化糜蛋白酶的方法，利用抑肽酶和胰蛋白酶、糜蛋白酶、其他蛋白酶水解酶亲和力的差异，纯化糜蛋白酶的方法，本发明方法可提高糜蛋白酶的纯度，并且对提高糜蛋白酶的稳定性，减少其用药副反应有重要的意义。 | ||
| 搜索关键词： | 抑肽酶 亲和 层析 纯化 蛋白酶 方法 | ||
【主权项】：
1.一种糜蛋白酶的亲和层析纯化方法，其特征在于该纯化的方法采用亲和层析技术，利用抑肽酶与胰蛋白酶、糜蛋白酶和其他蛋白水解酶亲和性的差异，使用化学反应使抑肽酶作为配基与琼酯糖4B结合，将胰蛋白酶去除；包括下列步骤：1)糜蛋白酶原活化液制备：糜蛋白酶原水溶液配制成硫酸铵饱和溶液，调节pH5.0，结晶，然后再重复结晶4次得糜蛋白酶原结晶，加入硫酸溶液，加第四次结晶1倍量v/w的磷酸缓冲液，调节pH7.6，加入胰蛋白酶，5℃冷却活化后制得糜蛋白酶原活化液；2)糜蛋白酶原活化液纯化：上述糜蛋白酶原活化液过滤，滤液调节pH5.0，进入亲和层析柱上样，上样结束后，用半个亲和层析柱床体积0.01MpH5.0磷酸缓冲液洗涤，合并上样液和洗涤液，过滤取滤液冻干得糜蛋白酶纯化结晶。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海第一生化药业有限公司，未经上海第一生化药业有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/200610030122.0/，转载请声明来源钻瓜专利网。
